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目的 胶质瘤作为神经系统最常见的肿瘤,尽管临床上手术切除+术后放化疗联合应用,复发率依然偏高,对患者的预后生存质量有明显的影响。目前已有研究表明人钠耦合中性氨基酸转运蛋白1(human sodium coupled neutral amino acid transporter 1,SNAT1)在人体多器官组织中呈异常高表达,可能参与了肿瘤组织生长侵袭过程。为此通过检测在神经胶质瘤组织中SNAT1蛋白的表达水平,探究其在胶质瘤组织中的表达与临床病理参数,从而判断SNAT1蛋白对胶质瘤患者预后生存的影响。 方法 选取2008年1月至2011年12月于郑州大学第五附属医院神经外科治疗的89例胶质瘤患者的胶质瘤组织及38例重型颅脑外伤患者的正常对照脑组织。纳入标准为患者初次发病,显微镜下肿瘤组织全切除,术前未接受放疗,化疗以及其他治疗,术后均统一接受化疗。89 例胶质瘤患者中低级别胶质瘤 55 例(WHOⅠ-Ⅱ),高级别胶质瘤(WHOⅢ-Ⅳ)34例,用免疫组织化学Envision法(二步法),蛋白质印迹法观察胶质瘤组织和正常对照组织中的SNAT1蛋白的表达与分布,采用两独立样本t检验分析蛋白质印迹中SNAT1蛋白的表达的差异,采用χ2检验分析SNAT1蛋白的表达与临床病理参数间(患者年龄,性别,肿瘤直径,病理级别,胶质瘤细胞成分,癫痫发作情况,术前KPS评分,头晕病史,累及功能区,肿瘤部位,肿瘤位置)的关系,采用 Kaplan-Meier 法观察SNAT1蛋白的不同表达对患者预后生存的影响,建立Cox回归多因素模型分析影响患者预后的独立危险因素。 结果 1. SNAT1 蛋白免疫组化显示情况:SNAT1 蛋白在肿瘤组织中的表达主要在胞浆中,可见黄色或棕黄色的颗粒物质,其阳性表达率为 79.78%,阴性对照组中SNAT1阳性表达率为36.84%,肿瘤组织中SNAT1的表达明显高于阴性对照组(χ2=22.177,P=0.000)。高病理级别肿瘤组织中 SNAT1 蛋白的阳性表达率为97.06%,低病理级别组织中SNAT1蛋白的阳性表达率为69.09%,高病理级别中SNAT1蛋白阳性表达率明显高于低病理级别组织(χ2=10.186,P=0.001)。 2. SNAT1蛋白印记法显示情况:将实验标本SNAT1蛋白的光密度条带与内参GAPDH蛋白条带值进行相比,所得值n代表SNAT1蛋白表达水平,在对照组织中为 n=0.14±0.11 ,肿瘤组织中为 n=0.41±0.21,低病理级别中为n=0.32±0.13,高病理级别中为n=0.52±0.09,胶质瘤组织中SNAT1蛋白表达高于阴性对照组(t=-8.226,P=0.002),高病理级别中SNAT1蛋白表达水平高于低病理级别组织(t=-6.682,P=0.003)。 3. SNAT1蛋白的表达与临床病理因素的关系:纳入与SNAT1蛋白表达可能相关的临床相关因素,经χ2处理后可发现:SNAT1蛋白的表达与病理级别(χ2=8.527,P=0.001),肿瘤直径(χ2=4.963,P=0.013),癫痫发作情况(χ2=4.133,P=0.018),头晕病史(χ2=9.404,P=0.001)有关(均P<0.05),与患者年龄(χ2=0.545,P=0.232)、性别(χ2=0.633,P=0.297)、胶质瘤细胞成分(χ2=2.476,P=0.061)、术前KPS评分(χ2=1.830,P=0.084)、肿瘤左右侧(χ2=0.491,P=0.782)、累及功能区(χ2=0.223,P=0.421)、部位(χ2=0.262,P=0.877)无关(P>0.05)。 4. SNAT1蛋白的表达与预后的的关系:通过Kaplan-Meier法制作生存曲线,将 SNAT1 阴性表达归入低表达组,可知 SNAT1 蛋白低表达组患者术后生存时间明显长于高表达组患者(Log-Rank=19.631,P=0.000)。 5. 影响胶质瘤患者术后生存时间的因素:对可能影响胶质瘤患者预后的因素:年龄、性别、肿瘤直径、SNAT1蛋白表达程度、肿瘤部位、肿瘤病理级别、KPS评分,将以上因素全部纳入多因素Cox回归模型显示:SNAT1蛋白不同表达(HR=3.470 ,95%CI:1.207~9.978 )和肿瘤病理级别(HR=2.951 ,95%CI:1.372~6.351)是影响胶质瘤患者预后的独立危险因素(P<0.05)。 结论 1. 胶质瘤组织中 SNAT1 蛋白的阳性表达率明显高于阴性对照组织中SNAT1蛋白的表达,且高级别胶质瘤组织中SNAT1蛋白的阳性表达率明显高于低级别胶质瘤,提示SNAT1蛋白与胶质瘤的病理分级存在正相关性,可能是反应肿瘤特征的另一新的蛋白诊断标志物。 2. SNAT1蛋白的不同表达与患者预后生存时间之间存在正相关性,其有望成为判断胶质瘤生物学特征及评价患者预后的分子新靶点。