秦川牛同期发情、超数排卵和胚胎冷冻保存的研究

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建立胚胎基因库是目前家畜保种中最为经济、有效的方法之一。同期发情、超数排卵和胚胎冷冻保存技术相结合是获得胚胎和建立胚胎基因库的核心技术。本研究以秦川牛为研究对象,对其进行同期发情、超数排卵和胚胎冷冻研究,筛选出了适合秦川牛同期发情、超数排卵和胚胎冷冻的方法,并探讨了相关影响因素,为胚胎基因库的建立提供了依据。试验结果如下: 1.在对秦川牛进行同期发情处理中,四种方案的同期发情率分别为60.0%、75.0%、53.3%和79.3%,其中方案Ⅳ(79.3%)显著高于方案Ⅲ(53.3%)(P<0.05),其余各方案间差异均不显著(P>0.05); 2.应用“2次PG法”在夏秋(5—10月)和冬春季(11—4月)共处理秦川牛供体84头次,两季的同期发情率(82.5%、75.0%)差异不显著(P>0.05); 3.用加拿大产FSH共超排处理秦川牛供体33头次,其中超排有效20头次,有效率64.5%,头均黄体数13.30±4.27个,头均获胚总数6.45±5.78枚,头均可用胚数4.20±4.63枚; 4.用加拿大产FSH超排处理秦川牛供体时,分为三个剂量组,分别为260mg、300mg和340mg。三个剂量组间的头均黄体数(12.67±5.50、14.40±3.91、13.11±3.95)差异均不显著(P>0.05);300mg剂量组头均获胚总数(9.20±6.91)显著高于260mg剂量组(5.33±5.75)和340mg剂量组(5.67±5.34)(P<0.05):300mg剂量组的头均可用胚数显著高于260mg剂量组(3.33±3.56)和340mg剂量组(3.22±2.54)(P<0.05);260mg和340mg剂量组的头均获胚总数(5.33±5.75、5.67±5.34)之间,头均可用胚数(3.33±3.56、3.22±2.54)之间差异均不显著(P<0.05); 5.在夏秋季(5—10月)和冬春季(11—4月)共超排秦川牛供体20头次,头均黄体数(12.82±4.62、13.89±3.98)两季差异不显著(P>0.05),冬春季的头均获胚总数(8.56±6.02)和头均可用胚数(6.00±6.02)显著高于夏秋季(4.73±5.22、2.73±2.53)(P<0.05); 6.对秦川牛供体连续超排3次,间隔70天,对超排效果无显著影响; 7.用甘油作冷冻保护剂对秦川牛7日龄桑椹胚或囊胚进行常规快速冷冻,结果显示,甘油浓度分别为1.5、2.0、2.5和3.0mol/L时,胚胎的冻后发育率分别为40%、80%、80%和20%。甘油浓度在2.0~2.5mol/L时,胚胎的冻后发育率最高(80%),显著地高于1.5和3.0mol/L(P<0.05);
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