【摘 要】
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目的研究Raf激酶抑制蛋白对宫颈癌细胞化疗敏感性的影响。方法以脂质体法将含有人全长RKIP基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)一ssRKIP转染入宫颈癌Hela细胞中,用G418筛选出含目
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目的研究Raf激酶抑制蛋白对宫颈癌细胞化疗敏感性的影响。方法以脂质体法将含有人全长RKIP基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)一ssRKIP转染入宫颈癌Hela细胞中,用G418筛选出含目的基因的稳定细胞系,Western blotting法检测Hela细胞中RKIP蛋白的表达。不同浓度顺铂作用不同时间,MTT法观察RKIP转染对顺铂作用于Hela细胞体外增值的影响,流式细胞术检测RKIP基因转染对顺铂诱导Hela细胞凋亡的影响。结果pcDNA3.1(+)-ssRKIP转染的Hela细胞RKIP蛋白表达明显升高。不同浓度的顺铂分别处理各组细胞24、48、72h后,RKIP基因转染的Hela细胞增殖抑制率显著高于对照组细胞(P<0.05)。以5μg/ml顺铂作用Hela细胞24h后,RKIP转染组细胞的凋亡率为(23.2±0.24)%,明显高于未转染组的(12.4±0.31)%和转染空质粒组的(13.4±0.47)%(P<0.05)；在无顺铂作用情况下,RKIP转染组的细胞凋亡率为(5.7±0.12)%,仍然高于未转染组的(2.9±0.21)%和转染空质粒组的(3.6±0.08)%(P<0.05)。结论RKIP基因表达上调可以增强宫颈癌Hela细胞对化疗药物顺铂的敏感性。
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