目的:在前期研究中，发现人羊膜上皮细胞水通道蛋白3(AQP3)的表达与羊水量异常相关，但其调控机制未明。通过研究调控人羊膜上皮细胞AQP3表达的环磷酸腺苷-蛋白激酶A(cAMP-PKA)信号转导通路，明确人羊膜上皮细胞中AQP3表达的调控机制，为临床上治疗羊水量异常提供新思路。　　 方法:(1)体外原代培养足月妊娠羊水量正常的人羊膜上皮细胞。(2)分别用①cAMP激动剂Forskolin处理人羊膜上皮细胞，不同浓度Forskolin(0、2.5、5、50、100μmol/L)作用2h和最佳浓度Forskolin不同作用时间(0、1、2、10、20h)。同时加入等量的DMS0作为溶剂对照组。②PKA激动剂SP-cAMP处理人羊膜上皮细胞，不同浓度SP-cAMP(0、2.5、5、50、100μmol/L)作用2h和最佳浓度SP-cAMP不同作用时间(0、1、2、10、20h)。③PKA抑制剂H-89处理人羊膜上皮细胞，不同浓度H-89(0、5、10、50、100μmol/L)作用2h和最佳浓度H-89不同作用时间(0、1、2、10、20h)。以上①②③不同作用时间组设置空白对照，不同浓度组采用CCK-8法检测细胞增殖率。④最佳浓度的Forskolin+最佳浓度H-89处理人羊膜上皮细胞2h。(3)采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定Forskolin、SP-cAMP和H-89作用前后人羊膜上皮细胞内cAMP含量及PKA活性表达变化。(4)采用免疫细胞化学染色方法检测AQP3蛋白在人羊膜上皮细胞中的定位。(5)采用蛋白质印迹技术检测人羊膜上皮细胞中总CREB、磷酸化CREB(p-CREB)和AQP3蛋白表达水平。　　 结果:(1)免疫细胞化学染色方法发现AQP3蛋白表达于人羊膜上皮细胞的胞浆及胞膜，以胞浆为主，Forskolin、SP-cAMP和H-89不同浓度和不同时间作用后，AQP3表达定位未见明显变化。(2)不同浓度Forskolin、SP-cAMP和H-89作用人羊膜上皮细胞的细胞增殖率无显著性差异。(3)空白对照组细胞内cAMP含量、PKA活性、总CREB、p-CREB和AQP3蛋白表达在不同作用时间均未见显著性差异。(4) cAMP含量、PKA活性、p-CREB和AQP3蛋白表达，在5μmol/L Forskolin作用2h组较0μmol/L作用2h组明显上调，差异有统计学意义;最佳浓度Forskolin作用10h组比0h组明显上调，差异有统计学意义。总CREB表达在各浓度组和各时间组均无显著性差异。(5) PKA活性、p-CREB和AQP3蛋白表达，在SP-cAMP50μmol/L作用2h组较0μmol/L作用2h组显著上调，差异有统计学意义;最佳浓度SP-cAMP作用10h组比0h组明显上调，差异有统计学意义。cAMP含量及总CREB表达在各浓度组和各时间组均无显著性差异。(6)PKA活性、p-CREB和AQP3蛋白表达，在H-8910μmol/L作用2h组较0μmol/L作用2h组明显下调，差异有统计学意义;最佳浓度H-89作用2h组较0h组明显下调，差异有统计学意义。cAMP含量及总CREB表达在各浓度组和各时间组均无显著性差异。(7) Forskolin+H-89处理人羊膜上皮细胞2h后，p-CREB和AQP3蛋白表达较Forskolin处理组明显下调，但高于H-89处理组，差异有统计学意义。总CREB表达无显著性差异。　　 结论:(1) AQP3蛋白表达于人羊膜上皮细胞的胞浆及胞膜，以胞浆为主。(2)Forskolin能够上调人羊膜上皮细胞中cAMP含量、PKA活性、p-CREB表达水平，进而上调人羊膜上皮细胞中AQP3蛋白的表达水平，提示Forskolin可能通过激活cAMP-PKA信号转导通路来调节人羊膜上皮细胞中AQP3蛋白表达水平。(3)SP-cAMP能够上调人羊膜上皮细胞中PKA活性、p-CREB表达水平，进而上调人羊膜上皮细胞中AQP3蛋白的表达水平，提示SP-cAMP可能通过激活PKA途径来调节人羊膜上皮细胞中AQP3蛋白表达水平。(4)H-89能够下调入羊膜上皮细胞中PKA活性、p-CREB表达水平，进而下调人羊膜上皮细胞中AQP3蛋白的表达水平，提示H-89可能通过抑制PKA途径来调节人羊膜上皮细胞中AQP3蛋白表达水平。(5) Forskolin+H-89处理组p-CREB和AQP3蛋白表达水平较Forskolin处理组明显下调，表明PKA活性增加在Forskolin上调AQP3蛋白表达的过程中起重要作用。(6) cAMP-PKA信号转导通路在调控原代培养人羊膜上皮细胞AQP3蛋白表达中发挥重要作用。