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目的：观察尿酸对体外培养的SD大鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响，并对其作用机制进行初步的研究。
方法：1.采用组织块贴壁培养法培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)，实验选用3～6代生长状态良好的VSMC，将尿酸作为干预因素，分为：对照组和尿酸组，尿酸组又分为三个浓度组(20、40、60mg/L)，培养24h后用[3H]胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法和水溶性四唑盐(WST-1)法来检测细胞增殖情况。2.实验选用3～6代生长状态良好的VSMC，仍将尿酸作为干预因素，分为：对照组和尿酸组，尿酸组又分为三个时间组(24h、48h、72h)，培养不同时间后用3H-TdR掺入法和WST-1法来检测细胞增殖情况。3.实验选用3～6代生长状态良好的VSMC，将尿酸作为刺激因素，ERK1/2 MAPK抑制剂PD98059作为干预因素，分别设：对照组、尿酸组、PD98059组和PD98059+尿酸组，静止的细胞先经PD98059预处理，然后加入尿酸共同作用。采用3H-TdR掺入法和WST-1法来评估细胞增殖被抑制的情况。4.采用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测尿酸诱导大鼠VSMC ERK1/2 mRNA表达的情况。5.采用RT-PCR检测尿酸对经PD98059预处理的大鼠VSMC ERK1/2mRNA的表达情况。
结果：1.尿酸可以诱导体外培养的大鼠VSMC增殖。低浓度的尿酸(20mg/L)促进VSMC增殖的作用与对照组相比差异显著(P<0.01)；随着尿酸浓度增高(40 mg/L、60 mg/L)，细胞3H-TdR掺入量以及WST-1 OD值显著增加，与对照组相比差异显著(P<0.001)。在一定浓度范围内(20～60 mg/L)，尿酸以浓度依赖方式促进VSMC增殖，(F=103.199，P<0.001)，并且各浓度之间相比较差异有统计学意义(P<0.05)。2.40 mg/L尿酸与VSMC作用24h促进VSMC增殖的作用与对照组相比差异显著(P<0.001)，随着尿酸作用时间的延长，细胞3H-TdR掺入量以及WST-1 OD值增大，与对照组相比差异显著增大(P<0.001)。在一定时间范围内(24～72h)，尿酸以时间依赖方式促进VSMC增殖(F=14.987，P<0.005)，各时间点之间相比较也有统计学意义(P<0.01)。3.单纯尿酸组与对照组相比3H-TdR掺入量以及WST-1 OD值有显著性差异(P<0.001)。PD98059与尿酸共同作用后使VSMC 3H-TdR掺入量和WST-1 OD值较单纯尿酸组降低，与尿酸组相比较差异有统计学意义(P<0.01)；与对照组相比较仍有一定程度的增殖(P<0.05)。PD98059组与对照组相比3H-TdR掺入量以及WST-1 OD值差异无统计学意义(P>0.05)。4.大鼠VSMC与尿酸培养液共同培养24h后，尿酸可诱导大鼠VSMC ERK1/2mRNA的表达。5.PD98059能抑制尿酸诱导的大鼠VSMC ERK1/2mRNA的表达。
结论：1.尿酸可以诱导体外培养的大鼠VSMC增殖。2.在一定浓度范围内尿酸以浓度依赖方式促进VSMC增殖。3.在一定时间范围内尿酸以时间依赖方式促进VSMC增殖。4.尿酸诱导VSMCERK1/2 mRNA的表达增加是导致VSMC增殖的重要原因。5.ERK1/2MAPK是介导尿酸促增殖效应的重要通路。