【摘 要】
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由于公猪精子对低温的敏感性高于其他动物,因此尚未将其冷冻保存应用在商业领域。本研究的目的是评价冷冻前添加HSPA8和解冻后添加精浆（SP）对猪精液品质的影响。试验采用假阴道法采集长白猪精液,以0.5μg/ml HSPA8的浓度添加到猪精液冷冻保护剂中进行细管分装,对猪精子进行冷冻,存放在液氮中保存3周后进行解冻,解冻后再次添加不同浓度精浆（10%、30%、50%）,对冻融后的长白猪精子的精子质膜完
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由于公猪精子对低温的敏感性高于其他动物,因此尚未将其冷冻保存应用在商业领域。本研究的目的是评价冷冻前添加HSPA8和解冻后添加精浆（SP）对猪精液品质的影响。试验采用假阴道法采集长白猪精液,以0.5μg/ml HSPA8的浓度添加到猪精液冷冻保护剂中进行细管分装,对猪精子进行冷冻,存放在液氮中保存3周后进行解冻,解冻后再次添加不同浓度精浆（10%、30%、50%）,对冻融后的长白猪精子的精子质膜完整性、顶体完整性、细胞凋亡、线粒体膜电位、鱼精蛋白缺乏及体外获能水平等技术环节进行评估。本试验旨在探索冷冻前添加HSPA8和解冻后添加不同浓度精浆对冻融猪精子的影响,为猪精液的冷冻保存及商业化生产提供一定的技术支撑。试验结果如下:1.与3%甘油对照组相比,添加0.5μg/ml HSPA8且未向解冻稀释液中添加精浆时,精子运动参数、质膜完整性、顶体完整性、线粒体膜电位、细胞凋亡等参数均显著提升（P<0.05）,精子WOB和LIN无显著差异（P>0.05）;精子鱼精蛋白缺失率显著降低（P<0.05）;精子酪氨酸磷酸化水平显著提高（P<0.05）。2.与解冻稀释液中未添加精浆组相比,发现添加精浆浓度为30%时精子活力、质膜完整性、顶体完整性、线粒体膜电位开始得到显著改善（P<0.05）,精浆浓度为50%时精子活率和LIN也开始得到显著改善（P<0.05）,当精浆浓度为50%时改善的效果最佳,且显著高于对照组（P<0.05）。3.与解冻稀释液中未添加精浆组相比,发现添加精浆浓度为30%时精子鱼精蛋白水平开始显著降低（P<0.05）,当精浆浓度为50%时改善的效果最佳,且显著高于对照组（P<0.05）。4.与3%甘油对照组相比,添加0.5μg/ml HSPA8且未向解冻稀释液中添加精浆和向解冻稀释液中添加不同浓度的精浆处理组,精子蛋白的酪氨酸磷酸化水平均显著提高（P<0.05）。其中添加0.5μg/ml HSPA8且未向解冻稀释液中添加精浆组与在解冻稀释液中添加10%精浆处理组之间无显著差异（P>0.05）,且添加50%精浆的处理组精子蛋白的酪氨酸磷酸化水平显著高于其他试验组（P<0.05）。以上结果表明,在冷冻保护剂中添加HSPA8来冷冻保存猪精子、在解冻稀释液中添加精浆,均可显著提高精子的活力、质膜完整性、顶体完整性、线粒体膜电位、细胞凋亡和蛋白酪氨酸磷酸化水平,尤其当精浆添加量达到50%时效果更加显著。本研究改善了猪精液冷冻保护剂,可为猪精液的冷冻及良种保存提供一定的商业价值。
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