蛙虹彩病毒RGV一个膜蛋白基因的鉴定

来源 :中国科学院水生生物研究所 | 被引量 : 3次 | 上传用户:lovelyhuanhuan
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从本实验室保存的蛙虹彩病毒(Ranivirus)RGV(Rana grylio virus)的基因组中,克隆出一个预测可能是膜蛋白的基因MMP (Myristylated membrane protein),运用病毒学技术、免疫学技术和分子生物学技术,对MMP基因进行特征分析。根据与RGV同源性很高的FV3相应基因设计引物从RGV基因组中克隆出全长1038bp的MMP基因,对其测序并使用几种软件进行分析。MMP基因最大的ORF长972bp,编码323个氨基酸,分子量为35kDa,氨基酸序列与同属的其它病毒相应蛋白的同源性高达91-99%,预测氨基酸序列有一个跨膜区。对MMP基因进行原核表达,得到分子量为53 kDa的缺失跨膜区的融合蛋白表达产物,制备出抗体。通过亚细胞定位和Western blot等实验初步证实MMP基因编码膜蛋白。
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