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目的：分析云南省烧伤中心分离病原菌的耐药性及其中铜绿假单胞菌的同源性,以期指导临床用药。方法：①对2010-2012年从云南省烧伤中心烧伤感染患者的各类标本中分离出的病原菌,采用法国生物梅里埃公司VITEK2COMPACT全自动细菌鉴定仪鉴定细菌,用纸片扩散法(K-B法)进行药物敏感试验,分析烧伤中心病原菌对各种常用抗菌药物的耐药性。②收集2012年3月-2012年8月烧伤中心分离的铜绿假单胞菌58株(剔除重复菌株),采用双纸片协同试验金属酶表型确证试验；用聚合酶链反应(PCR)检测金属酶基因(imp、vim、spm、gim);脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌株同源性。结果：①从烧伤患者中分离病原菌2105株,革兰阳性菌占27.9%(588/2105),革兰阳性菌中最常见为金黄色葡萄球菌(321/2105)、凝固酶阴性葡萄球菌(177/2105)、粪肠球菌(58/2105)、屎肠球菌(20/2105)；革兰阴性菌占72.1%(1517/2105),革兰阴性菌中前6位菌种依次为铜绿假单胞菌(733/2105)、不动杆菌属(397/2105)、克雷伯菌属(120/2105)、肠杆菌属(77/2105)、变形菌属(50/2105)和大肠埃希菌(48/2105)。药敏试验结果显示：革兰阳性球菌中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率46.9%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对环丙沙星、左氧氟沙星、复方新诺明的耐药率菌高于93%,未发现耐万古霉素、利奈唑胺的葡萄球菌及肠球菌。革兰阴性杆菌中,铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为92.3%和90.2%,对阿米卡星、米诺环素,氨曲南,头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮-舒巴坦和哌拉西林-他唑巴坦的耐药率均在55.5%-91.3%,呈现多重耐药情况,不动杆菌属对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为82.2%和81.6%,对头孢他啶、头孢毗肟、氨基糖苷类和氟喹诺酮类等抗菌药物的耐药率均较高。肠杆菌科细菌对氨苄西林、哌拉西林、头孢他啶,头孢噻肟、复方新诺明等耐药率均大于50%以上,检出少数铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌对现用抗菌药(除多黏菌素外)均耐药的泛耐药菌株。②双纸片协同试验显示,58株铜绿假单胞菌中有8株金属酶表型阳性；PCR结果显示,58株菌中有8株铜绿假单胞菌经金属酶基因检测发现均为vim型阳性株,未检出imp、spm及gim型金属酶,与金属酶表型阳性情况一致；58株铜绿假单胞菌中筛选出52株耐碳青霉烯类抗生素菌株,6株铜绿假单胞菌为碳青酶烯类抗生素敏感株。对52株碳青霉烯类抗生素耐药菌株进行PFGE同源性分析,结果分为3个型。其中A型有20株,B型有17株,C型有15株。结论：烧伤中心病房主要病原菌前三位分别为铜绿假单胞菌、不动杆菌属、金黄色葡萄球菌,其中铜绿假单胞菌及不动杆菌属对碳青酶烯类抗生素的耐药率>80%,对其它的抗生素的耐药率为>70%,克雷伯菌属、肠杆菌属、变性菌属、大肠埃希菌对β内酰胺酶类抗生素的耐药率为>70%,对碳青酶烯类抗生素的敏感率均在>93%,对喹诺酮类抗生素耐药率在>43%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对环丙沙星、左氧氟沙星、复方新诺明的耐药率菌高于93%以上,未发现耐万古霉素、利奈唑胺的葡萄球菌及肠球菌,上述结果提示烧伤中心的耐药情况严重,应加强烧伤中心细菌耐药率监测,对指导临床合理用药及减少多重耐药菌株产生。58株铜绿假单胞菌中8株金属酶表型阳性,PCR增金属酶基因型为vim型,未检出imp、spm及gim等其余金属酶基因。结果表明云南省烧伤中心铜绿假单胞菌碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制可能不是产金属β-内酰胺酶,存在其它的耐药机制如外膜蛋白缺失、外排泵的表达等,有待于我们进一步的研究。52株(含8株金属酶基因阳性菌株)碳青霉烯类抗生素耐药菌株PFGE同源性分析显示3个型别,表明耐药的铜绿假单胞菌在医院烧伤病存在不同克隆株流行,具有导致感染暴发流行的危险性,应加强医护人员的手卫生,阻断传播途径,防止多重铜绿假单胞菌在烧伤病房的爆发流行。