论文部分内容阅读
该课题试图通过体内外研究,了解IGF-IR在甲状腺乳头状癌中的表达及其对癌细胞生长的影响,探讨从阻断生长因子受体角度来辅助治疗甲状腺恶性肿瘤的可能性.第一部分,甲状腺乳头状癌中胰岛素样生长因子-1受体的表达.目的：研究IGF-IR在甲状腺肿瘤组织中的表达;IGF-IR的不同表达程度与甲状腺乳头状癌临床特征的关系.方法：采用免疫组织化学法检测正常甲状腺、甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿、甲状腺乳头状癌组织中IGF-IR水平.结论：IGF-IR在甲状腺乳头状癌的发生中具有一这作用,其表达程度与癌肿的侵袭性相关.第二部分,IGF-IR在甲状腺乳头状癌细胞生长中的作用及其单克隆抗体对癌细胞的体外干预.目的：研究IGF-IR与甲状腺乳头状癌细胞增殖活性及细胞凋亡的关系;IGF-IR单克隆抗体（IGF-IRmAb）对原代培养的甲状腺癌细胞及其周围正常细胞的增殖活性的影响,探讨从阻断生长因子受体角度来辅助治疗甲状腺恶性肿瘤的可能性.方法：以人甲状腺乳头状癌细胞株CGTH W-3、原代培养的甲状腺乳头状癌细胞和周围正常滤泡上皮细胞为研究对象,在含10﹪胎牛血清的RPMI1640培养基中培养细胞.1、以不同浓度（200nM、100nM、50nM、12.5nM）的IGF-IRmAb对CGTH W-3细胞进行不同时段（24h、48h、72h、96h）的干预,MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞仪、TUNEL法检测IGF-IRmAb作用48小时的细胞凋亡指数.2、MTT法检测100nM IGF-IRmAb对原代培养的甲状腺乳头状癌细胞和周围正常滤泡上皮细胞的增殖活性的影响.结论：在甲状腺乳头状癌发生过程中,高表达的IGF-IR不仅与癌细胞增殖有关,它还可保护细胞免遭凋亡.IGF-IRmAb可有效地抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖,而对周围正常滤泡上皮细胞伤害较小.第三部分,甲状腺乳头状癌细胞中IGF-IR介导的磷脂酰肌醇-3激酶信号转导途径的作用.目的：了解IGF-I刺激下的磷脂酰肌醇-3激酶（PI-3K）信号转导途径对于甲状腺乳头状癌细胞增殖活性的影响.了解IGF-I刺激下的磷脂酰肌醇-3激酶（PI-3K）信号转导途径对于甲状腺乳头状癌细胞增殖活性的影响.方法：以CGTH W-3细胞为研究对象,在无血清培养基中培养细胞.1、MTT法检测100nM IGF-IRmAb、1000nM Wortmannin（PI-3K特异性抑制剂）对无生长因子刺激下CGTH W-3细胞增殖活性的影响.2、在100ng/mL（1.3×10<-8>M）的IGF-I刺激下,MTT法检测不同浓度（1000nM、100nM、10nM）的Wortmannin、100nM的IGF-IRmAb及其与1000nM的Wortmannin联合应用对细胞增殖活性的影响.3、分别在无血清培养基、条件培养基中培养细胞,得到细胞上清液,放免法检测其IGF-I含量;并与不含细胞的培养基中测得的IGF-I含量做对照.结论：Wortmannin可抑制IGF-I刺激的CGTH W-3细胞,但它与IGF-IRmAb联合应用时,并没有产生相加效应,提示IGF-IR介导的促CGTH W-3细胞增殖作用部分是通过PI-3K信号转导途径来完成的.CGTH W-3细胞不能自分泌IGF-I.