弓形虫病是由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)引起的一种人兽共患原虫病。弓形虫宿主种类十分广泛,常见的动物和人均可感染发病,家畜中以猪最为易感且发病率和死亡率较高。猪弓形虫病由于感染部位较多,临床表现复杂,确诊困难,给早期诊断及有效预防带来较大困难。弓形虫的宿主范围广泛,在不同动物体内的弓形虫可能具有不同的生物学特征,因此研究弓形虫分子遗传学及分子流行病学对弓形虫病的诊断和防制具有重要意义。早期对弓形虫分离株的分类只是根据弓形虫对鼠的致病力强弱将其分为强毒株和弱毒株。随着寄生虫分子遗传学的发展,现已从研究弓形虫的表型发展到研究其基因型。从基因水平上研究弓形虫的分类、分布以及毒力等特征,已初步形成了将弓形虫虫株分为多个基因型的观点,并在一系列的研究中逐渐摸索出弓形虫基因型在不同地区以及宿主的分布规律。从分子水平诊断弓形虫将为弓形虫分子遗传学进一步研究以及弓形虫病的防制提供资料。1.为了掌握河南省猪弓形虫病的感染情况,作者在河南省郑州、信阳、驻马店、焦作、洛阳、南阳等地区各个门诊及猪场收集了疑似弓形虫病猪的病料1647份,应用我实验室建立的巢氏PCR进行分子流行病学调查,该方法主要用于检测弓形虫的B1基因。通过PCR方法确诊来寻找阳性病例。结论：寻找到31株阳性虫株,阳性率为1.88%,且都是来自于仔猪。2.为了方便在实验室条件下开展弓形虫入侵细胞及其免疫逃避机制等方面深入研究,我们开展了用MDCK和BHK-21细胞培养弓形虫的研究。于感染后每隔12h分别取出培养皿中的盖玻片进行吉姆萨染色,二甲苯透明后,显微镜下观察弓形虫体外增殖情况。结果显示,弓形虫对宿主细胞的选择性不强,可以感染MDCK和BHK-21细胞,且在感染后第7天出现了繁殖高峰。3.为从分子水平了解河南省猪弓形虫分离株的基因型,作者选择5个微卫星位点：TuB2、W35、TgM-A、B18和B17,对本试验中分离株和国际标准株RH株进行多重PCR扩增,并对PCR扩增产物进行测序,了解微卫星的重复序列数后与标准基因型比较分析,最后确定河南省猪源弓形虫分离株基因型。微卫星位点分析结果显示,RH株为基因型Ⅰ,与国外报道的一致。而NY-5、NY-8、NY-9、NY-11、NY-13和NY-16株TUB2基因重复序列是(TG)9, TG重复数与以往报道有所不同。W35基因位点的重复序列是(TC) 4CC (TC) 2 (TG) 2,又与非典型型情况类似。综合分析这六个虫株的五个微卫星位点,属于新的基因型。本项研究证明河南省猪源弓形虫包含了新的基因型。