茯苓是多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw.)Wolf的干燥菌核,是常用中药之一,具有祛湿利水、健脾和胃、宁心安神、补体强身等作用。茯苓在中药复方中具有较高的使用频率,在一些经典中药复方中常发挥健脾作用,如参苓白术散和琼玉膏等。茯苓化学组分根据其溶解特性,主要可以分为醇溶性的三萜酸、水溶性和碱溶性多糖等3类成分。在以健脾为主要功效复方中,茯苓多以粉入药,此时3类主要成分均进入机体的消化系统被吸收和代谢,但哪类化合物才是茯苓发挥健脾功效的物质基础,未见有文献进行系统性地研究报道。为了更好地开发利用茯苓这种药物资源,有必要对其物质基础进行系统地研究。本文在对茯苓中3种化学组分进行提取分离和化学表征的基础上,应用顺铂诱导的小鼠肠损伤模型,从抗炎作用、肠道微生物多样性和代谢调节角度评价各类化学组分在茯苓肠道保护活性中所发挥的作用,探究茯苓抗顺铂肠损伤的药效物质基础。论文共分成3个部分:一、茯苓中三萜酸类组分的表征利用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱法(UPLC-QTOF-MS/MS)对茯苓三萜酸类物质定性分析时,通常会产生大量的质谱数据,手动搜索解析通常费时费力,且难以区分具有相似裂解途径的同分异构体。因此有必要建立对茯苓中三萜酸类化合物快速筛选鉴定的方法。本章基于茯苓中三萜酸类物质具有相似骨架结构及修饰基团的特点,首先建立了同系物预测数据库对茯苓中潜在的三萜类化合物结构进行预测。随后结合茯苓中三萜酸的UPLC-QTOF-MS/MS数据,对潜在的三萜酸类物质进行快速筛选。最后通过对照品及文献中三萜酸类化合物的裂解规律和色谱行为,对筛选出的化合物进行鉴定。通过建立的快速筛选鉴定方法,共鉴定出62个三萜酸类化合物,其中有17个化合物为首次在茯苓中鉴定发现。本研究在对茯苓中三萜酸类成分提取时,首先以乙醇为溶剂进行提取,再用乙酸乙酯对乙醇提取物进一步萃取,以富集有效成分,最终提取得率为0.30%。但茯苓醇提物和后续乙酸乙酯萃取物的化学一致性的研究还未见报道,因此有必要对使用乙酸乙酯进一步萃取的价值进行科学评估。在上述定性分析基础上,通过UPLC-QTOF-MS/MS模拟三重四级杆质谱(TQ-MS)建立的模拟多反应监测(mMRM)模式,对茯苓乙醇提取物和后续乙酸乙酯萃取物中23个主要三萜酸类成分进行了定量和相对定量分析。实现了在同一台LC-QTOF-MS/MS仪器上对获苓三萜酸类成分进行同时定性定量分析的方法。并通过转移率和富集率的计算证明了乙醇提取物和乙酸乙酯萃取物具有较好的化学一致性,且进一步萃取可以有效富集三萜酸类成分。为使用乙酸乙酯对醇提物进一步萃取的价值提供科学依据。二、茯苓中多糖类组分的表征先后通过水提法和碱提法对茯苓中的水溶性和碱溶性多糖组分进行了提取,最终提取得率分别为0.3 8%和63.7%。利用HPGPC对茯苓中水溶性多糖的分子量分布进行了测定,结果显示水溶性多糖的分子量分布范围约在3.0×103～2.3 ×107 Da之间。随后建立并验证了利用HPLC-DAD对茯苓中单糖组成进行表征的方法,对茯苓中水溶性和碱溶性多糖的单糖组成进行了测定,结果显示水溶性多糖是由甘露糖、葡萄糖和半乳糖按摩尔比1.00:8.37:2.23组成,而碱溶性多糖主要由葡萄糖组成。三、茯苓抗顺铂肠损伤的药效物质基础研究本章应用顺铂诱导的小鼠肠损伤模型,从抗炎作用、肠道微生物多样性和代谢调节角度评价三萜酸、水溶性和碱溶性多糖这3类组分在茯苓肠道保护活性中所发挥的作用。结果显示,顺铂能导致小鼠肠粘膜结构紊乱、隐窝结构异常和炎性细胞浸润,同时还能引起外周血中炎症因子IL-2以及TNF-α的上升,水溶性多糖对顺铂引起的小鼠结肠形态结构的异常和炎症反应都有较好的调节作用;肠道菌群多样性方面,水溶性多糖能调节由顺铂引起的肠道菌群结构的改变,增加益生菌(如Prevotellaceae)的相对含量,同时降低条件致病菌(如Ruminococcaceae和Helicobacteraceae)的相对含量;代谢调节方面,水溶性多糖对顺铂造成的小鼠血清、尿液及粪便的代谢紊乱都具有相对较好的回调效果,三萜酸对尿液代谢紊乱有较好的回调效果,代谢通路结果分析表明,水溶性多糖可以通过调节机体脂质代谢、氨基酸代谢和嘌呤代谢等代谢通路的紊乱,恢复机体的能量、氨基酸和核苷酸代谢平衡,以缓解顺铂所致的肠道损伤。因此综合抗炎作用、肠道微生物多样性和代谢调节,推测水溶性多糖在茯苓肠道保护活性中发挥主要作用,且与茯苓具有相似的作用机制。