Pantoea agglomerans TCa-7抗紫外辐射损伤作用的研究

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本文从深圳福田红树林常年阳光照射充足的区域采集样品,筛选出一株具有抗紫外辐射损伤作用的菌株TCa-7(Pantoea agglomerans);发酵提取胞外多糖,纯化获得具有抗氧化能力的活性组分EPS Ⅰ,进行初步分析;系统研究胞外多糖EPS Ⅰ的体外抗氧化活性,和对多种微生物的紫外辐射防护作用。 (1) 通过两方面筛选菌株。初筛利用高剂量的紫外辐射,分离得到15株菌;测定15株菌的紫外存活率,获得4株抗辐射菌。复筛检测4株抗辐射菌代谢产物的紫外辐射防护和抗氧化能力:测定抗辐射菌发酵液和多糖提取物对大肠埃希氏菌的紫外防护作用,菌株TCa-7的作用最强;测定体外抗氧化能力,TCa-7的多糖提取物对于O2-和·OH有最强的清除作用。确定TCa-7是一株具有强抗紫外能力和能够代谢抗氧化、抗辐射活性多糖的优良菌株。鉴定结果TCa-7为成团泛菌(Pantoea agglomerans)。 (2) 发酵Pantoea agglomeransTCa-7,提取、纯化胞外多糖,获得具有抗氧化能力的活性组分EPS Ⅰ。EPS Ⅰ分子量为757kDa;糖含量75.3%,含阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖,摩尔比为1.0:2.2:2.7,另外还含有少量的甘露糖;糖醛酸含量13.3%;蛋白含量14.9%。 (3) EPS Ⅰ的体外抗氧化活性实验结果表明,EPS Ⅰ具有较高的抗氧化活性,其抗氧化作用呈剂量依赖性。多糖EPS Ⅰ对O2-和·OH的半数抑制浓度(IC50)分别约为0.24mg/mL和0.25mg/mL;EPS Ⅰ含量为0.06mg/mL时,对脂质过氧化的抑制率为30.17%。EPS Ⅰ较低浓度就具有很好的清除自由基和抑制脂质过氧化作用。 EPS Ⅰ可以清除紫外辐射引发的氧自由基,间接保护微生物,提高其在紫外辐射下的存活率。EPS Ⅰ的抗紫外辐射损伤实验表明,浓度为0.5‰时,对微生物有最好的辐射防护作用。对革兰氏阴性菌和芽孢杆菌的抗辐射率最大,可达到50%以上;对革兰氏阳性菌的保护作用次之,对酵母细胞保护作用最小。这可能是由于微生物细胞壁成分的不同造成。
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