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本论文利用木糖、木二糖、木三糖、木四糖、木五糖和木六糖培养鼠伤寒沙门氏菌,研究木糖及低聚木糖对其增殖的影响,并将培养后的细菌孵育猪肠道上皮细胞,测定细菌粘附率,同时分析细菌转录组学,另外将木糖及低聚木糖与鼠伤寒沙门氏菌共孵育猪肠道上皮细胞,测定细菌粘附率、侵袭率、细胞损伤程度以及细胞黏蛋白基因的表达,以探索木糖及低聚木糖对鼠伤寒沙门氏菌增殖及其粘附肠道上皮细胞的调控作用。试验一:木糖及低聚木糖对鼠伤寒沙门氏菌增殖的影响用浓度为5mg/mL的木糖及低聚木糖培养鼠伤寒沙门氏菌,对照组加入等体积的PBS,培养期间在3h、6h、9h、14h、24h和36h取菌液测定OD值,用标准曲线计算细菌浓度。结果表明,木糖对鼠伤寒沙门氏菌增殖有显著抑制作用(P<0.05),木二糖、木四糖则无显著影响(P>0.05),木三糖在9h-24h对鼠伤寒沙门氏菌增殖有促进作用(P<0.05),木五糖在0h-9h对鼠伤寒沙门氏菌增殖有抑制作用(P<0.05),在培养后期对其无显著影响(P>0.05),木六糖对鼠伤寒沙门氏菌增殖有一定的抑制作用,但没达到显著水平(P>0.05)。试验二:木糖及低聚木糖与鼠伤寒沙门氏菌共培养9h后细菌对IPEC-J2的粘附率用浓度为5mg/mL的木糖、木二糖、木三糖、木四糖、木五糖和木六糖培养鼠伤寒沙门氏菌9h,菌液经PBS洗涤后用于处理细胞,测定细菌对细胞的粘附率。结果表明,木糖、木二糖、木三糖、木四糖、木五糖和木六糖处理过的细菌对细胞的粘附率显著低于对照组(P<0.05),降低的比例分别为49.35%、27.13%、37.04%、17.48%、21.91%、41.20%。试验三:木糖及低聚木糖对鼠伤寒沙门氏菌转录组学的影响用浓度为5mg/mL的木糖及低聚木糖培养沙门氏菌9h,提取总RNA进行转录组学分析,分析差异表达倍数达到2倍的基因。结果表明:(1)木糖组上调的基因有63个,下调的基因有24个。木糖组上调的基因galK、spe A、smpB与细菌生长、粘附定殖能力相关;下调的基因wzzE与细菌LPS组装相关。(2)木二糖组上调的基因有25个,下调的基因有20个。木二糖组上调的ara B、ara E基因与阿拉伯糖代谢相关,galK与细菌定殖能力相关。(3)木三糖组上调的基因有39个,下调的基因有22个。木三糖组筛选的差异表达基因与生长、粘附能力不相关。(4)木四糖组上调的基因有9个,下调的基因有15个。木四糖组筛选的差异表达基因与生长、粘附能力不相关。(5)木五糖组上调的基因有114个,下调的基因有95个。木五糖组上调的基因中sicA、lip A、lonH与细菌粘附能力有关,aro A与鞭毛生成相关,dps、bioF与生物膜形成相关,speE、graK、osmY、yfdQ、rne与细菌增殖相关,pur G、metC与细菌在细胞内复制存活能力相关;下调的基因中yidE、nar Z与细菌粘附能力有关,mgtA与细菌运动相关,fad L与生物膜形成相关,nanA与细菌在人体富含粘液的表面利用碳源的能力相关。(6)木六糖组上调的基因有212个,下调的基因有51个。木六糖组上调的基因中dgt、oadA、yjgB、tkt A、pgm、speE、speA、rne与细菌增殖代谢活动相关,htp G与肠道定殖及细胞内存活相关,artI、cyaA、yae T、bioF参与生物膜和外膜形成;下调的基因中aspA与细菌增殖代谢相关,nanA与细菌利用碳源的能力相关。试验四:木糖及低聚木糖与鼠伤寒沙门氏菌混合液对IPEC-J2的粘附率、侵袭率、细胞损伤程度的影响用浓度为3mg/mL木糖及低聚木糖与鼠伤寒沙门氏菌菌液以1:2比例混合处理细胞,测定细菌粘附率、侵袭率、细胞LDH释放量。结果表明,木糖、木二糖、木四糖、木五糖和木六糖均能显著降低鼠伤寒沙门氏菌对细胞的粘附(P<0.05),降低的比例分别为60.81%、45.95%、41.89%、59.46%、27.03%,木三糖有降低鼠伤寒沙门氏菌粘附的趋势(P=0.068),相比对照组降低24.32%。木糖、木二糖、木三糖、木四糖、木五糖和木六糖能显著降低鼠伤寒沙门氏菌的侵袭率(P<0.05)。细胞LDH释放量试验中,木二糖组LDH释放量显著高于对照组(P<0.05),其余各组与对照组没有显著差异(P>0.05)。试验五:木糖及低聚木糖与鼠伤寒沙门氏菌混合液对IPEC-J2黏蛋白基因表达的影响用浓度为3mg/mL木糖及低聚木糖与鼠伤寒沙门氏菌菌液以1:2比例混合处理细胞,提取细胞RNA,测定细胞黏蛋白基因MUC1、MUC2、MUC12、MUC13、MUC20的表达量。结果表明,各组之间MUC1、MUC2、MUC12、MUC20的表达没有显著差异(P>0.05)。木三糖组的MUC13表达与对照组没有显著差异(P>0.05),木糖组、木二糖组、木四糖组、木五糖组、木六糖组MUC13表达均显著低于对照组(P<0.05)。以上结果表明,木糖及低聚木糖影响鼠伤寒沙门氏菌增殖及其对细胞的粘附,其中基于对鼠伤寒沙门氏菌粘附力的影响是其干预鼠伤寒沙门氏菌损伤细胞更为主要的作用途径。