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本研究主要基于由实验室筛选的健康人体肠道的七株益生菌和八种常用益生元,通过建立一套体外筛选和优化流程寻找合适的益生菌和益生元组合成胆固醇去除最佳的合生元。
第一轮以益生菌对益生元的利用性为筛选标准,结果表明其利用性呈菌种特异性。被测七株益生菌中,植物乳杆菌LS12,LS31,Lp529及瘤胃乳杆菌La3可以利用的益生元种类较多及利用程度较大,被列为合生元候选益生菌。
第二轮以益生菌在以益生元为碳源的条件下胆汁盐的耐受性为筛选标准。相比参考碳源葡萄糖,所有七株益生菌的胆汁盐耐受性均可以被以菌株特异的益生元所提高。LS12以其最佳的胆汁盐耐受性及益生元利用性被筛选为合生元中的益生菌。而低聚果糖,水苏糖,低聚半乳糖和低聚异麦芽糖可以调高LS12的胆汁盐耐受性,而低聚异麦芽糖和甘露醇可以较好的支持其生长,故此五种益生元被筛选为合生元组合中的益生元。
采用响应曲面法优化合生元的胆固醇去除能力的结果表明,部分因子析因实验筛选到了显著影响胆固醇去除的重要益生元因子甘露醇和低聚半乳糖,而低聚果糖,水苏糖和低聚异麦芽糖均不能显著影响胆固醇去除效力;最速上升法为甘露醇和低聚半乳糖寻找了到靠近最优化响应曲面的组合水平:甘露醇(x3=5.2% w/v) 和低聚半乳糖 (x4=4.5% w/v);将此组合水平作为旋转中心实验的中心点进行优化实验,得到二阶拟合方程,模型预测甘露醇含量为5.42%和低聚半乳糖含量为4.74%时,有胆固醇去除最大值52.76μg/ml。