近年来,动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)所引起的心血管疾病的死亡率持续增加,并逐步高于肿瘤及其他疾病。由于其发病隐蔽且易被忽视,故被称为“沉默的杀手”。虽然目前临床上已经有了各种成熟的AS诊断影像学方法,但其均存在着一些不足:操作过程复杂、花费时间较长,对患者生理条件有一定要求;检查结果直观、准确性高的冠状动脉造影及血管内超声检查也具有重复性差的缺点。另外,这些诊断方法只是针对AS的后期阶段,即多针对斑块进行成像,并不能达到在斑块形成之前“早发现”的目的,故亟需开发一种在斑块形成之前进行检测诊断的方法,以期可提前10～20年诊断出AS。为了解决这个问题,本研究拟以自主合成的两个具有邻三酚羟基结构的萘酰亚胺类荧光探针TBNG和GNTB,并结合从实验对象中提取的生物同源性血小板膜(Mp),通过共挤压方式获得萘酰亚胺类检测体系TBNG@Mp和GNTB@Mp。当该纳米体系到达早期AS的病灶部位后,在膜融合作用下,具有活性氧(Reactive oxygen species,ROS)响应的萘酰亚胺类荧光探针TBNG或GNTB可进入细胞内,随后在小动物活体成像仪中,可在胸主动脉观察到荧光信号,从而实现早期AS检测的目的。本文的研究内容主要分为以下三个方面:1)萘酰亚胺类检测体系的制备。本部分采用分步合成法,对TBNG和GNTB的合成路线进行优化,并对各产物进行分离纯化,采用傅立叶变换红外光谱(FTIR)、核磁共振氢谱(1H NMR)等进行结构表征;利用紫外-可见分光光度法(UV-Vis)和荧光分析法用来检验其是否具有荧光性质;利用羟基自由基清除实验来验证其是否具有ROS识别能力。此外,采用具有泡沫细胞识别作用的Mp包裹探针,并采用动态光散射(DLS)、UV-Vis和荧光分析法对其进行相关表征。结果表明,两个萘酰亚胺类荧光探针TBNG和GNTB均已成功合成,且均具有紫外吸收和荧光吸收;羟基自由基清除实验也间接表明二者具有ROS识别能力。另外,DLS、UV-Vis和荧光分析法均表明Mp已成功包裹,所形成的两个萘酰亚胺类检测体系TBNG@Mp和GNTB@Mp的粒径大小均为120 nm左右,二者大小无明显区别,且TBNG@Mp和GNTB@Mp的包封率分别为70.4±2.13%和69.1±1.9%。这表明TBNG@Mp和GNTB@Mp均成功制备,为后续的体内外活性研究奠定了基础。2)萘酰亚胺类检测体系的细胞毒性研究。本部分以小鼠腹腔巨噬细胞RW264.7细胞株和人脐静脉内皮细胞HUVEC细胞株为模型,采用MTT法考察TBNG@Mp和GNTB@Mp对RAW 264.7和HUVEC细胞的增殖过程的影响,以筛选出生物形容性较好的萘酰亚胺类检测体系。结果表明,经生物材料血小板膜Mp包裹的TBNG和GNTB的细胞毒性显著降低;但与GNTB@Mp相比,TBNG@Mp对RAW 264.7和HUVEC细胞的毒性较小,说明本研究所制备的TBNG@Mp纳米检测体系生物相容性较好,不会造成血管内皮的损伤,进而不会加剧AS病灶部位的炎症反应,故TBNG@Mp可用于早期AS大鼠模型的体内成像研究。3)萘酰亚胺类检测体系的体内荧光成像研究。本部分通过观察不同时间段动物模型相关指标的变化,判断AS早期动物模型是否构建成功。早期AS模型构建成功后,采用尾静脉注射萘酰亚胺类检测体系TBNG@Mp的方法,借助小动物活体成像仪评价其对早期AS大鼠的检测作用及体内分布情况。结果表明,该萘酰亚胺类检测体系TBNG@Mp可在注射2 h后在早期AS大鼠的胸主动脉处积聚并显示荧光信号,随后可被肝脏代谢。这说明TBNG@Mp是一种生物相容性良好,可用于早期AS检测的纳米检测体系。综上所述,本文成功制备了一种具有早期AS检测作用的新型萘酰亚胺类荧光探针检测体系TBNG@Mp。且体内外实验结果显示,该纳米检测体系的毒性小,生物相容性好,可为ASCVD和其他氧化应激性疾病的早期检测提供相应的理论依据。