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稻瘟病严重危害了水稻产量,一直以来稻瘟菌杀菌剂的相关研究受到了国内外的广泛关注。稻瘟菌中的三羟基萘酚还原酶(3HNR)在黑色素的生物合成过程中起了关键作用,是黑色素生物合成抑制剂(MBIs)的重要靶酶。MBIs类抑制剂是通过抑制稻瘟菌黑色素的生成从而抑制病菌对其他植物的侵染,属于间接杀菌剂。以三环唑为代表的MBIs类抑制剂由于不直接抑制稻瘟菌的生长,所以其抗性较低,有较长的使用历史。甾醇14α-脱甲基化酶(CYP51)在真核生物的留醇合成中起着重要的作用,是真菌抑制剂的重要靶酶。CYP51抑制剂(DMIs)能够减少甾醇的生成,导致真菌细胞膜的结构和功能受到影响,能够直接杀死真菌,属于直接杀生型抑制剂。以三唑类化合物为代表的DMIs类抑制剂具有较高的杀菌效率的同时也表现出了较高的抗性。现在报道过的杀菌剂还没有同时具备这两种类型杀菌剂的优点,因而需要研发出一种新型的杀菌剂,使其兼具抑制黑色素分泌和抑制菌体生长的特点。因此本文试图寻找到既能作用于稻瘟菌3HNR又能作用于CYP51的“一剂双靶”新型抑制剂。本文主要进行了下面几个方面的工作:1、对利什曼原虫CYP51进行了异源表达,采用亲和层析方法纯化得到了目的蛋白,通过SDS-PAGE电泳检验蛋白的纯度,并通过光谱分析技术检测蛋白性质。2、建立了测定利什曼原虫CYP51和抑制剂结合光谱的实验体系,分别以利什曼原虫CYP51和稻瘟菌3HNR为靶标进行了抑制剂筛选,得到了在酶体上有较好抑制效果的化合物。与利什曼原虫CYP51结合能力最强的化合物是C3Sl,解离常数Kd值为0.25±0.03μM,化合物hs32br对3HNR的抑制效果最好,IC50值为0.29±0.02μM。3、对硝基苯乙烯等几类化合物的稻瘟菌菌体抑制活性进行了评价,抑菌效果最好的化合物是hs65,EC50值为9.5±0.4ppm。综合分析酶体和菌体的实验结果,为化合物的进一步改造提供了依据。