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目的:探讨微小RNA miR-195对肝癌耐药细胞株Bel-7402/5-FU5-氟尿嘧啶敏感性的影响以及作用机制。 方法:运用miRNAs芯片技术筛选Bel-7402及Bel-7402/5-FU细胞中差异表达miRNAs;运用靶基因预测软件pictar并结合miRNAs芯片结果预测差异表达miRNAs可能调控的Bcl-2基因家族靶基因;miR-195真核表达质粒载体pSilencer3.1-H1 neo/miR-195的构建;将miR-195真核表达质粒载体转染至Bel-7402/5-FU细胞;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western-blot检测细胞Bcl-2、Bcl-XL、Bax、p53蛋白表达的情况。 结果:miRNAs芯片结果显示Bel-7402/5-FU及Bel-7402两种细胞同一miRNA表达量比值大于2的高表达miRNA有miR-192和miR-194,同一miRNA表达量比值小于0.5的低表达miRNA有miR-195、miR-199a、miR-200a、miR-125a等;pictar软件预测与Bcl-2基因家族特异性作用的miRNAs有:miR-107、miR-15a、miR-16、miR-103、miR-195、miR-122等共31种,结合miRNAs芯片结果,选择miR-195作为我们研究的miRNA;流式细胞术:Bel-7402/5-FU细胞miR-195载体转染组、阴性对照cel-miR-67转染组、空载体转染组及未转染组,用406μg/ml5-Fu处理24小时的上述4组细胞,流式细胞仪检测,Bel-7402/5-FU细胞miR-195载体转染组凋亡率较阴性对照转染cel-miR-67组、转染空载体组和未转染组增加,其凋亡率分别为:12.1±0.64％、2.5±0.53%、2.2±0.48%、1±0.52%;加药处理24小时的凋亡率分别为26.9±0.89%、9.8±0.77%、9.2±0.78%、7.6±0.86%;Western-blot检测结果显示:miR-195可降低Bel-7402/5-FU细胞的Bcl-2、Bcl-xl蛋白表达水平,升高Bax、p53蛋白表达水平。 结论:miR-195增加 Bel-7402/5-FU细胞对5-Fu的敏感性,促进Bel-7402/5-FU细胞凋亡;miR-195可降低Bel-7402/5-FU细胞Bcl-2、Bcl-xl蛋白表达水平、升高Bax、p53蛋白表达水平。