富硒啤酒酵母培养条件的优化及对小鼠毒性试验研究

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试验一啤酒酵母与3种益生菌耐硒能力的比较   在含硒量分别为1、5、10、15、20μg/ml的液体培养基中,分别接种经过3次复苏活化的嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、啤酒酵母和产朊假丝酵母,37℃,培养24 h后,应用固体计数培养基进行菌落计数培养,比较啤酒酵母与其它3种菌的耐硒能力。结果发现,啤酒酵母、产阮假丝酵母、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的最大耐硒浓度分别为10-15μg/ml、5-10μg/ml、5-10μg/ml和10-15μg/ml。说明啤酒酵母具有较大的耐硒性能,可以作为富硒菌株。   试验二高通量富硒啤酒酵母培养条件的优化   通过单因子试验和正交试验,在优化发酵条件的基础上,以啤酒酵母的生物量和有机硒含量为指标评价啤酒酵母的富硒效果。结果表明,啤酒酵母的最佳富硒条件为:250 ml三角瓶中,装液量80 ml,5%接种量,10μg/mlSe浓度,34℃,培养24 h。在此发酵条件下,啤酒酵母的有机硒含量达1024±121μg/g,有机硒转化率为94.03%±6.14%,生物量达5.02±1.18×1011 cfu/g。   试验三富硒啤酒酵母对小鼠的急性毒性与蓄积毒性试验   采用急性经口毒性试验和20d蓄积试验法测定小鼠的半数致死量(LD50)和蓄积系数,评价富硒啤酒酵母急性毒性和蓄积毒性。结果表明,富硒啤酒酵母硒对小鼠的LD50值为27.6829mg/kg·bw,其95%可信限为25.4146-30.1516,蓄积系数K=6.9625>5。因此,富硒啤酒酵母对昆明小鼠的急性毒性和蓄积毒性均较低。
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