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目的在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型上,观察缺氧缺血后不同时间点皮质、海马、纹状体及小脑中AP4M1、AMPA受体的表达变化,以探寻缺氧缺血性脑损伤的机制。材料及方法本课题选用7日龄SD(Sprague Dawley)大鼠为实验对象,制备缺氧缺血性脑损伤模型(HIBD),应用Real-time PCR、Western blot从在体层面研究HI后12小时、24小时、72小时皮质、海马、纹状体及小脑中AP4M1、AMPA受体m RNA和蛋白水平的表达变化。结果1 HI后AP4M1、AMPA受体在皮质中表达变化1)HI后12小时皮质中AP4M1 m RNA表达下调,24小时较前升高,72小时恢复至正常水平(F=3.587,p=0.043);HI后12小时AP4M1蛋白出现显著表达下调,72小时较前升高,仍低于正常对照组(F=5.320,p=0.022)。2)HI后12小时皮质中Glu R1 m RNA出现表达下调,24小时后较前升高,72小时表达仍显著低于正常对照组(F=103.000,p=0.000);HI后12小时Glu R1蛋白显著表达下调,24小时较前升高,72小时仍低于正常对照组(F=574.711,p=0.000)。3)HI后12小时皮质中Glu R2 m RNA表达无显著变化,24小时表达下调,72小时较前轻度升高,仍低于正常对照组(F=7.823,p=0.005);HI后12小时Glu R2蛋白表达轻度下调,24小时表达显著下调,72小时较前轻度升高,仍低于正常对照组(F=410.933,p=0.000)。2 HI后AP4M1、AMPA受体在海马中表达变化1)HI后12小时海马中AP4M1 m RNA表达下调,24小时降至最低,72小时较前升高,仍显著低于正常对照组(F=154.327,p=0.000);HI后12小时AP4M1蛋白显著表达下调,24小时表达降至最低,72小时较前升高,仍低于正常对照组(F=330.060,p=0.000)。2)HI后12小时海马中Glu R1 m RNA表达下调,24小时下调至最低,72小时表达较前升高,仍显著低于正常对照组(F=9.074,p=0.003);HI后12小时Glu R1蛋白显著表达下调,24降至最低,72小时较前高,仍低于正常对照组(F=807.019,p=0.000)。3)HI后12小时海马中Glu R2 m RNA表达下调,24小时降至最低,72小时较前轻度升高,仍低于正常对照组(F=4.594,p=0.028);HI后12小时Glu R2蛋白表达轻度下调,24小时降至最低,72小时表达较前升高,仍低于正常对照组(F=425.574,p=0.000)。3 HI后AP4M1、AMPA受体在纹状体中表达变化1)HI后12小时纹状体中AP4M1 m RNA表达显著下调,24小时表达较前升高,72小时仍显著低于正常对照组(F=8.556,p=0.003);HI后12小时AP4M1蛋白显著下调,24小时表达较前升高,72小时仍低于正常对照组(F=555.071,p=0.000)。2)HI后12小时纹状体中Glu R1 m RNA表达下调,72小时表达较前升高,仍显著低于正常对照组(F=161.996,p=0.000);Glu R1蛋白在HI后12小时、24小时及72小时无显著差异(F=0.908,p=0.437),均低于正常对照组。3)HI后12小时纹状体中Glu R2 m RNA表达下调至最低,24小时表达较前升高,72小时表达仍低于正常对照组(F=18.483,p=0.000);HI后12小时Glu R2蛋白表达下调至最低,24小时表达较前升高,72小时表达仍低于正常对照组(F=90.438,p=0.000)。4 HI后AP4M1、AMPA受体在小脑中表达变化1)HI后12小时、24小时及72小时小脑中AP4M1 m RNA均低于正常对照组,三组间无显著差异(F=0.602,p=0.56);HI后12小时、24小时、72小时AP4M1蛋白均较正常对照组轻度下调,三组无显著统计学差异(F=1.184,p=0.369)。2)HI后12、24、72小时小脑中Glu R1 m RNA表达较正常对照组轻度下调,三组表达无显著统计学差异(F=0.102,p=0.903);HI后12小时Glu R1蛋白无显著变化,24小时显著下调,72小时较前表达无显著差异,仍低于正常对照组(F=312.032,p=0.000)。3)HI后12小时小脑中Glu R2 m RNA表达下调,24小时降至最低,72小时表达较前升高,仍低于正常对照组(F=56.718,p=0.000);HI后12小时Glu R2蛋白表达下调,24小时降至最低,72小时表达较前升高仍低于正常对照组(F=312.032,p=0.000)。结论1.HI后皮质、海马、纹状体及小脑中Glu R1和Glu R2在m RNA及蛋白水平出现不同程度表达下调;2.HI后皮质、海马和纹状体中AP4M1在m RNA及蛋白水平出现不同程度表达下调,而在小脑中的表达无显著变化;3.HI后皮质中AP4M1表达下调相对早于Glu R2;4.缺氧缺血对不同部位脑组织中AP4M1和Glu R2表达的影响并不一致。