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皮肤是人体最大的器官,作为机体的第一道生物防御屏障,可防止细菌等微生物的入侵,也可使机体免受外界环境理化因素的伤害。在急性创伤、烧伤等因素的影响下,皮肤正常生理功能和屏障功能遭到破坏,导致水电解质平衡紊乱、营养物质丢失或感染等的发生,甚至威胁生命。本课题根据理想创伤敷料的特点,应用细菌纤维素(Bacterial cellulose,BC)、玉米醇溶蛋白(Zein)、乙基纤维素(Ethyl cellulose,EC)、王不留行黄酮苷(Vaccarin,Vac)、光敏剂(Protoporphyrin IX,PPIX)等基材或药物进行创伤敷料的结构设计和研究,分别制备多层复合创伤敷料(Multilayer composite wound dressing,MC)的骨架层、促愈层和保护层,主要研究内容和结论如下:利用木醋杆菌(Gluconacetobacter xylinum)制备了BC膜,利用溶液浸渍法制成负载Vac的细菌纤维素膜(BC/Vac),并对材料的理化性质、力学性能、细胞毒性和药物释放等进行表征和评价。结果表明:BC和BC/Vac膜具有三维网状结构,两者的细胞毒性为0级,BC具有理想的生物相容性,BC/Vac膜具有促进细胞增殖的作用;BC干膜断裂强度和杨氏模量高,不易变形,但呈现较低的断裂伸长率,易碎裂。BC湿膜和BC/Vac复合膜具有一定的强度,延展性也较好,但表面湿滑,不易再加工和保存。同时通过药物释放实验发现,通过溶液浸渍法制备的BC/Vac复合膜在PBS溶液中出现了突释。进一步探讨机械性能良好且易再次加工和保存的细菌纤维素复合物,用于多层复合创伤敷料的制备。采用生物复合的方法,获得BC/PETN(BC/Polyester nonwoven fabric)复合膜。结果表明:BC/PETN复合膜具有纳米网状结构、良好的柔韧性以及机械性能。亲水性好,接触角为37.4±5.6°;吸湿性高,24 h的吸水量可达到883%。可作为本课题多层复合创伤敷料结构设计中的骨架层。为制备具有多重效应的活性伤口敷料,利用静电纺丝技术制备水稳定性高的Zein/EC复合膜,并分别负载药物Vac和PPIX,对上述复合膜进行结构表征和性能评价,结果表明:负载总聚合物质量为2%的Zein/EC/Vac纳米纤维膜显示最优的促细胞增殖效果,并且负载不同浓度药物的Zein/EC/Vac纳米纤维膜表现出良好的药物缓释能力。可作为本课题多层复合创伤敷料结构设计中的促愈层。通过抑菌圈实验、平板菌落计数法和细菌穿透实验观察,发现负载光敏剂PPIX的Zein/EC/PPIX纳米纤维膜能有效抑制细菌的生长,表现出理想的抗菌效果,其中负载低浓度光敏剂的Zein/EC/PPIX纤维膜显示更优的抗菌效果。可作为本课题多层复合创伤敷料结构设计中的保护层。基于上述研究,进一步制作多层复合创伤敷料。应用静电纺丝技术将Zein/EC/Vac和Zein/EC/PPIX纤维分别沉积在BC/PETN复合膜的两面,并用热压仪将三层结构加固,形成多层复合创伤敷料(MC)。制备小鼠急性皮肤损伤模型,将MC组设为实验组,分别将无菌纱布(Control)和纳米银敷料(Nano-Ag)作为阴性和阳性对照组,应用于小鼠皮肤伤口进行观察和作用机制研究。结果表明:MC组处理的小鼠伤口在造模后第10天,愈合率达到92.4%,显著高于Control组。病理学结果显示,在造模后第10天,MC组和Nano-Ag组创口缘已有新生表皮,肉芽组织填入,完成了组织重塑过程。应用蛋白质免疫印迹技术测定MC组与Control组PI3K/Akt通路中Akt、p-Akt和eNOS以及VEGF的表达水平,发现造模后第10天Akt的磷酸化程度,造模后第3天、第7天、第10天eNOS的相对表达量,造模后第3天VEGF的相对表达量,MC组均高于Control组,具有显著性差异。以上结果表明,应用本研究设计的多层复合创伤敷料处理伤口,可营造湿性愈合微环境,同时伴随药物的稳定持续释放,可能通过激活PI3K/Akt信号通路,促进伤口愈合。综上,本研究基于细菌纤维素膜,利用静电纺丝技术,负载具有促细胞增殖和抗菌作用的药物,制备具有活性敷料特点的多层复合创伤敷料,并探讨该敷料对创面愈合的影响及愈合作用机制,为临床皮肤创伤的治疗提供参考的思路和手段。