本实验将人肝癌细胞系HHCC-9724-P株接种到3种不同免疫缺陷和免疫正常BALB/c小鼠的不同部位，观察肿瘤的生长特点，测定小鼠免疫细胞和抗体的变化趋势及脾淋巴细胞对肝癌细胞杀伤力，探讨肝癌在不同免疫小鼠体内生长的模型特点及肝癌生长、转移与免疫间的相互关系。 本实验首先在体外培养人肝癌细胞系（HHCC-9724-P），达到一定数量的对数生长期时进行消化收取，然后接种到免疫正常的BALB/c，B细胞缺陷的CBA/N，T细胞缺陷的BALB/c-nu（nude）和T、B细胞严重联合缺陷的SCID小鼠的皮下、腹腔和肝内及用BLAB/c和CBA/N外周血免疫重建的SCID（BALB/c-PBL-SCID和CBA/N-PBL-SCID）皮下，监测肿瘤生长和转移情况。结果显示，肝癌细胞系在BALB/c小鼠体内各接种组不生长；在小鼠CBA/N的皮下、腹腔内组不生长，肝内组出现了少量的癌结节，但皮下随接种数达到2×10~7/0.2ml时，有癌结节出现，但到3周后又逐渐消失。nude、SCID和CBA/N-PBL-SCID各皮下接种组都有癌结节生长，但3组间癌体积差异显著（P＜0.05）；BALB/c-PBL-SCID皮下接种后长出的癌体到第3周逐渐有失；nude、SCID的腹腔或肝内接种组有广泛转移，而SCID小鼠的癌体大小、转移量和转移范围明显超过nude。 第四军医大学硕士学位论文 一 另一方面，本实验在接种癌细胞后监测小鼠体内免疫的变化。接 种后每周测定有B细胞的小鼠抗体变化，分别用小鼠血清与肝癌细胞 系进行凝集反应对比试验一5周后，取实验鼠进懈细胞毒杀伤实验； 同时测定具有 T细胞的，J、鼠 CD4”、CDS”T细胞百分率。结果表明， 脾细胞对靶细胞杀伤力依次为荷瘤CB洲、B从B／c、 CBA／N－PBL－SCID卜鼠，对照组及SCID、nude没杀伤性。CBA／N和 BALB儿的 CD4”、CDS＊细胞百分率均发生变化，CD4”T细胞下降 明显，CDS”T细胞变Jt不大。CD4”八b例降到 l．00左右。实验eA BALB儿，J、鼠血清与癌细胞凝集反应较强烈，B从B儿FBLECID和 CdC 依次次之Z 所测的B ALALB儿小鼠免疫球蛋白有一上升到下降的趋势， 而BALB儿PBL七CID小鼠是持续上升的，每毫升能达到毫克量。 结论：1．肝癌细胞在比ID体内百分之百成瘤，而且癌体比＿d：长 得更快更大，肝内接种转移率更高、转移范围和量更大，所以，SCID 是建立肝癌模型的最佳模型动物。2．本实验用 8 X 106的细胞数进行免 疫重建 SCID是成功的，不仅体现了 2种，J、鼠排斥肿瘤的特点，k且出 现的GVHD并不严重，因此SCID是兔疫重建和肿瘤免疫研究十分 理想的模型动物。3．肝原位和腹腔接种易发生转移，但肝内原位接种转 移率及转移范围更广。4l细胞在排斥肝癌中起主要作用，B细胞在抗 肿瘤中也起很重要的作用；在一定条件下，存在非T细胞依赖的B细 胞抗肿瘤或非B细胞依赖的T细胞排斥肿瘤作用；免疫细胞间存在着 相互促进的机制，肿瘤免疫需要综合性免疫。5．肿瘤在不同接种部位所 产生的免疫影响是不完全一样的；免疫在排斥肿瘤的同时，也受到肿 瘤抑制或影响。6．本实验h正明T细胞的细胞毒和B细胞产生的抗体是 异种特异性的抗肿瘤作用。