酪蛋白糖巨肽(Casein Glycomacropeptide, CGMP)是一种乳源性生物活性肽，其多肽链中含有唾液酸等糖链，具多种生理活性功能和营养特性，广泛应用于保健食品和医药品。本研究以酪蛋白为原料，对CGMP进行酶法制备及其分离纯化的研究。研究结果如下：(1)以糖基化程度(唾液酸/蛋白，μg/mg)为指标，从胃蛋白酶、胰蛋白酶、凝乳酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、风味酶和HAP碱性蛋白酶7种蛋白酶中，筛选出胃蛋白酶作为酪蛋白制备CGMP的最佳用酶。(2)通过单因素分析，以透析后未透析液中唾液酸量为指标，对胃蛋白酶水解酪蛋白制备CGMP的条件进行优化，最适酶解条件为：37℃、pH2.5、酶与酪蛋白浓度比800U/g蛋白、酪蛋白浓度4%，水解2h时所制备CGMP的产量最高，其中唾液酸含量达49.53μg/mL，理论推算CGMP含量为0.61mg/mL。(3)用DEAE-cellulose DE-52阴离子交换层析(2×20cm)对CGMP粗品进行初步分离，用0~0.4mol/L NaCl的0.01mol/L pH6.8醋酸-醋酸钠缓冲液进行梯度洗脱，0.5mL/min，3mL/管。结果得4个蛋白洗脱峰，只有峰I(0.1mol/L NaCl的醋酸-醋酸钠缓冲液洗脱)含有唾液酸即CGMP。(4)用SephadexG-100凝胶柱层析法对CGMP进行进一步的分离纯化，分离条件为：0.1mol/L pH6.8醋酸-醋酸钠缓冲液平衡，0.25mL/min，1.5mL/管。结果得3个蛋白洗脱峰，其中只有峰I-1中含有唾液酸即CGMP。(5)纯化产物峰I-1经SDS-PAGE电泳测其分子量为30kDa左右，紫外吸收法测其纯度达92.1%。(6)确定了以酪蛋白为原料，酶法制备、分离CGMP的生产工艺。