【摘 要】
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目的:本研究拟对去乙酰化酶SIRT1调控人卵丘颗粒细胞凋亡对单精子卵胞浆内显微注射的影响进行研究,并探讨SIRT1、FOXO3a通路调控颗粒细胞凋亡的机制。方法:采用免疫细胞化学
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目的:本研究拟对去乙酰化酶SIRT1调控人卵丘颗粒细胞凋亡对单精子卵胞浆内显微注射的影响进行研究,并探讨SIRT1、FOXO3a通路调控颗粒细胞凋亡的机制。方法:采用免疫细胞化学染色、Western-blot法检测人卵丘颗粒细胞SIRT1和FOXO3a蛋白的表达;采用Real-time PCR技术检测SIRT1和FOXO3a m RNA的表达;采用流式细胞术检测凋亡蛋白Caspase-3的活化情况,分析颗粒细胞凋亡率;采用化学发光法检测卵泡液各项生化免疫指标。结果:1、人卵丘颗粒细胞SIRT1蛋白表达与颗粒细胞凋亡显著相关(P<0.05)。2、随着颗粒细胞SIRT1表达增高,颗粒细胞凋亡率随之升高,穿卵泡数、获卵数、ICSI卵子数、受精数、卵裂数、优质胚胎数、囊胚形成数、囊胚冷冻数则随之下降(P<0.01)。3、人卵丘颗粒细胞SIRT1基因和蛋白的表达与FOXO3a表达显著相关(P<0.01)。4、卵泡液雌激素E2水平与颗粒细胞SIRT1表达显著相关(P<0.01)。结论:人卵丘颗粒细胞中SIRT1蛋白表达增加可促进颗粒细胞凋亡,使ICSI助孕过程中的穿卵泡数、获卵数、ICSI卵子数、受精数、卵裂数、优质胚胎数、囊胚形成数、囊胚冷冻数等指标受到影响,从而影响ICSI助孕结局。其作用机制可能是FOXO3a通过调控SIRT1基因转录诱导卵丘颗粒细胞凋亡。
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