不同频率电针天枢穴对活动期湿热型溃疡性结肠炎大鼠模型免疫细胞及肠道上皮细胞的影响

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目的:构建与人类湿热型溃疡性结肠炎的发病机制与病程变化最相近的大鼠动物模型,观察不同频率电针在治疗该动物模型活动期的疗效,评价电针不同频率对该模型的疗效情况。方法:1、健康3月龄SD大鼠共75只,雌雄各半,随机分成以下几组:空白组(K),模型对照组(M),电针2hz治疗组(A),电针50hz治疗组(B),电针100hz治疗组(C)。采用高脂高糖辛辣饮食喂养的基础上加用免疫复合法造成湿热型溃疡性结肠炎大鼠模型后,选用电针进行治疗,取天枢穴;A组予以电针2hz,B组予以电针50hz,C组予以电针100hz;每组每天用电针治疗一次,每次15分钟,共治疗五天。2、采集标本分三次:第一次:大鼠适应性喂养2周后,K组大鼠心脏采血2ML,置于试管中做IL-8和IL-13检测,采血后立即打开腹腔,截取肛门病变处结肠6cm,用生理盐水漂洗三次后,迅速肉眼观察评分,然后截取病变明显处肠段约2cm装入盛有固定液的标本瓶中,常规石蜡包埋,切片,HE染色,光镜观察;第二次:造模成功后M组大鼠按上述方法采取血及结肠组织标本;第三次:治疗五天后,将A、B、C组三组分别按上述方法采取血及结肠组织标本。3、数据统计:使用SPSS19.0统计软件对收集到的各项数据进行统计分析,采用均数±标准差表示(x±s)进行统计描述,两个以上的样本均数的比较使用单因素方差分析及方差分析的两两比较检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1、采用高糖高脂辛辣饮食喂养的基础上再用免疫复合法造模能成功地造成湿热型溃疡性结肠炎大鼠模型,且模型较为稳定;2、通过电针治疗溃疡性结肠炎活动期大鼠,其症候学指标明显好转,大鼠疾病活动指数(disease activity index,DAI)下降(P<0.05),其中电针100hz组各项指标好转较其余两组效佳;3、电针治疗活动期湿热型溃疡性结肠炎大鼠,结肠病理组织活检显示结肠粘膜明显修复,结肠粘膜损伤指数(colonmucosa damage index,CMDI)明显改善((P<0.05),其中电针100hz组镜下粘膜修复情况较其余两组佳;4、不同频率电针天枢穴对湿热型溃疡性结肠炎活动期大鼠血清免疫指标的影响:造模后,M组大鼠血清中IL-8较K组大鼠显著上升(P<0.05),IL-13较K组大鼠显著下降(P<0.05);治疗组(A、B、C)大鼠血清中IL-8较M组大鼠显著下降,IL-13较M组大鼠显著上升;其中三种不同频率治疗组两两比较,电针100hz组(C)大鼠血清中IL-8较电针50hz组(B)、电针2hz治疗组(A)显著下降(P<0.05),IL-13显著上升(P<0.05)。结论:电针能有效抑制炎症发展,改善紊乱的肠道菌群,调节机体免疫功能,改善肠粘膜血液循环状况,促进溃疡愈合,缓解全身症状,对活动期湿热型溃疡性结肠炎有较好的治疗作用,三种频率对比,以电针100hz组疗效更佳。
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