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北海涠洲终端采油废水目前采用的是厌氧折板反应器(ABR)和序批式活性污泥法(SBR)组合工艺,处理效果较好。分别采集涠洲终端的废水处理工艺组合ABR和SBR池冬夏两季的活性污泥,提取活性污泥的总DNA,采用PCR-DGGE以及16S rDNA高通量测序的方法,分析冬夏两季活性污泥中微生物的群落结构特征。 对比不同方法提取样品中DNA的结果发现,采用试剂盒改进法提取的DNA效果最好。通过PCR扩增条件优化发现,采用PrimeSTAR HS酶对60ng·μL-1的DNA样品扩增效果最佳,引物ITS1F/ITS4和ITS1F/ITS2对本实验样品的最佳退火温度分别为59.0℃和54.0℃。 通过PCR-DGGE对活性污泥中真菌菌群分析和16S rDNA的高通量测序结果表明,SBR池中夏季主要真菌菌群为假丝酵母属(Candida)、镰孢霉属(Fusarium)、曲霉属(Aspergillus)和葡萄穗霉属(Stachybotrys),所占的比例分别为39.13％、20.88%、16.34%和10.91%,主要细菌菌群为 DRC31、乳酸杆菌目(Lactobacillales)、芽孢杆菌目(Bacillales)、红螺菌目(Rhodospirillales)、未分类的γ-变形菌(Gammaproteobacteria)和根瘤菌目(Rhizobiales),所占的比例分别为18.16%、11.65%、6.97%、4.63%、4.33%和4.15%。SBR池冬季的主要真菌菌群为假丝酵母属(Candida)、镰孢霉属(Fusarium)和曲霉属(Aspergillus),所占的比例分别为56.72%、16.15%和11.92%,主要细菌菌群为假单胞菌目(Pseudomonadales)、梭菌目(Clostridiales)和乳酸杆菌目(Lactobacillales),所占的比例分别为35.57%、12.24%和8.90%。 通过PCR-DGGE对活性污泥中真菌菌群分析和16S rDNA的高通量测序结果还表明,ABR池夏季的主要真菌菌群为假丝酵母属(Candida)、葡萄穗霉属(Stachybotrys)、镰孢霉属(Fusarium)和曲霉属(Aspergillus),所占的比例分别为43.28%、33.44%、10.64%和9.96%,主要细菌菌群为根瘤菌目(Rhizobiales)、热袍菌目(Thermotogales)、放线菌目(Actinomycetales)、红螺菌目(Rhodospirillales)、未分类的 SJA-4和红杆菌(Rhodobacterales),所占的比例分别为13.15%、10.72%、10.38%、8.54%、8.42%和4.67%。ABR池冬季的主要真菌菌群为假丝酵母属(Candida)、镰孢霉属(Fusarium)、和曲霉属(Aspergillus),所占的比例分别为66.27%、12.41%和14.99%,主要细菌菌群为红螺菌目(Rhodospirillales)、放线菌目(Actinomycetales)、DRC31和未分类的γ-变形菌(Gammaproteobacteria),所占的比例分别为19.11%、18.44%、9.72%和8.13%。 冬季反应池中的菌群会出现某种菌群的比例大幅生高,导致冬季的菌群结构单一,而夏季反应池中的菌群丰度比冬季高,真菌和细菌的主要菌群分布较冬季均匀,结构较冬季复杂,它们是夏季反应池的COD平均去除率明显高于冬季的主要原因。实验结果可为实际生产的改进和构建高效除油复合菌提供理论依据。