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目的:人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus,HIV）感染严重的危害着人类的生命及健康。目前大量研究已证实艾滋病感染者尽早进行高效抗逆转录病毒疗法（highly active antiretroviral therapy,HAART）治疗,对降低HIV相关的发病率及病死率,重建患者免疫功能,减少HIV的传播有重大意义。经抗病毒治疗后,HIV所引起的免疫异常改变能恢复至正常或接近正常水平,即免疫功能重建,包括CD4+T淋巴细胞数量和功能的恢复。然而,据统计约20%的艾滋病病毒感染者尽管体内的病毒复制已经得到抑制,但免疫功能的重建仍然没有达到正常理想状态,这一部分的患者被称为免疫无应答者（Immunological nonresponders,INRs）。相比于免疫重建患者,INRs的发病率及死亡率的风险明显增高。已知多种因素可影响抗病毒治疗后免疫功能重建效果,但接受HAART治疗后的患者免疫功能无法恢复的机制尚不清楚。MicroRNA（miRNA）是一类高度保守的单链小分子RNA,作为非编码RNA中的重要成员,虽然仅有18-25个碱基,但在HIV感染的发生与发展中起着关键性的作用。miRNA对HIV病毒感染起到抑制或促进作用。许多研究在疾病进展的不同阶段发现了不同的miRNA谱。但关于临床早期有效预测HIV患者免疫功能重建的特异性标志物未见报道。本课题通过利用实时荧光定量PCR技术,检测抗病毒治疗后免疫重建效果不同的HIV感染者外周血miRNA表达量,筛选出能够预测抗病毒治疗后HIV感染者免疫功能重建差异的miRNA。方法:1.研究对象:研究组共纳入268名接受HAART治疗的HIV感染者,5名健康正常人。所有患者均经免疫印迹法确诊为HIV感染。将HIV感染者根据治疗12个月后的免疫重建效果分为两组,其中免疫无应答组（INR）为90人（治疗一年后CD4+T细胞计数较治疗初始时CD4+T细胞基线增加比例小于20%）,免疫应答组（IR）为178人（治疗一年后CD4+T细胞计数较治疗初始时CD4+T细胞基线增加比例大于30%）。2.实验步骤:取HIV感染者治疗前时间点的外周冻存血标本10ml;提取血浆Total miRNA;进行miRNA的逆转录;实时荧光定量PCR检测各阶段筛选miRNA表达水平。利用公式2-△△CT计算miRNA相对表达量。3.统计学分析:在TIBCO Spotfire 7.11的Statminer中,利用LIMMA及2-△△CT计算得出组间显著差异表达的miRNA及其改变倍数。SPSS 19.0统计软件进行数据分析。应用GraphPad Prism 7.0绘图软件进行绘图。数据均以?x±s表示,P<0.05表示差异有统计学意义结果:1.444条miRNA经过发现、筛查、确证三阶段的筛选得到7条miRNA,其在INR与IR患者间存在显著差异表达,且在INR患者中皆为表达上调。2.筛查阶段7条miRNA联合诊断INR的曲线下面积为0.936,敏感度和特异度分别为0.878和0.906,确证阶段7条miRNA联合诊断INR的曲线下面积为0.865,敏感度和特异度分别为0.786和0.860。3.7条miRNA表达量与治疗12个月后CD4+T细胞计数呈负相关（P<0.05）,与治疗后CD4+T细胞计数增加比例呈负相关（P<0.05）。结论:INR与IR患者血浆中存在7条miRNA显著差异表达,且INR患者的表达水平高于IR患者,7条miRNA联合能够早期判断HIV感染者接受治疗后免疫重建的效果是否良好。