【摘 要】
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目的:在之前的研究中,我们通过高通量测序发现circCDYL在膀胱肿瘤组织中广泛的表达,但其具体的作用及作用机制尚不明确,本研究的主要目的就是探索circCDYL在膀胱癌中的作用及机制,以及其存在的潜在临床应用价值。方法:在本研究中,我们首先通过收集30例临床手术病人膀胱癌组织标本获得临床样本,然后分别提取膀胱肿瘤组织及相对应的正常膀胱黏膜上皮组织和不同的膀胱肿瘤细胞系的RNA,通过QRT-PCR
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目的:在之前的研究中,我们通过高通量测序发现circCDYL在膀胱肿瘤组织中广泛的表达,但其具体的作用及作用机制尚不明确,本研究的主要目的就是探索circCDYL在膀胱癌中的作用及机制,以及其存在的潜在临床应用价值。方法:在本研究中,我们首先通过收集30例临床手术病人膀胱癌组织标本获得临床样本,然后分别提取膀胱肿瘤组织及相对应的正常膀胱黏膜上皮组织和不同的膀胱肿瘤细胞系的RNA,通过QRT-PCR(实时荧光定量PCR)技术检测膀胱癌组织和细胞系中circCDYL的表达水平。然后通过构建circCDYL过表达质粒,并转染到不同膀胱肿瘤细胞系中,通过稳筛获得circCDYL过表达的细胞系。Transwell法和细胞划痕实验法被用来检测细胞的迁移能力,流式细胞术检测细胞周期以及Western blot实验方法检测蛋白含量的表达。结果:实验结果表明,circCDYL在膀胱癌组织和不同细胞系中均有低表达。并且circCDYL的过表达在功能上抑制了膀胱癌细胞的生长和迁移。重要的是,过表达circCDYL降低了EJ和T24T细胞系中C-MYC的蛋白水平。然而,C-MYC的mRNA表达水平并没有明显的改变。除此之外,C-MYC的过表达可部分地逆转circCDYL所诱导的膀胱癌细胞G0/G1期细胞周期阻滞。结论:我们的研究结果表明,circCDYL通过下调C-MYC的表达,在膀胱癌中发挥抑癌作用,这种环状RNA可能成为膀胱癌治疗的新靶点。
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