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目的:Survivin是凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein,IAP)家族成员之一,常在肝癌细胞中呈现高表达,但其在肝癌进展中的作用尚未完全阐明。本实验通过以全反式维甲酸(all-trans retinoic acid ,ATRA)诱导肝癌细胞凋亡并抑制细胞增殖,观察survivin基因及其产物表达的变化,探讨ATRA在肝癌治疗中的作用和survivin在肝癌发展过程中所起到的影响,进一步证实以survivin作为治疗靶点的合理性。方法:用MTT法筛选出ATRA不同作用浓度后,分别以含50μmol/l和10μmol/lATRA的1640培养液孵育人肝癌细胞SMMC-7721,孵育6天后,计数活细胞,观察ATRA对肝癌细胞增殖的抑制情况;通过倒置显微镜、微分干涉和电镜联合判断细胞形态变化;流式细胞仪检测不同浓度ATRA作用6天后细胞凋亡和细胞周期的变化;RT-PCR方法测定survivin mRNA在ATRA作用前后和不同作用浓度下的变化情况;通过Western-blot和免疫细胞化学方法检测survivin蛋白的表达,观察ATRA对肝癌细胞survivin蛋白表达的影响。结果:不同浓度的ATRA对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖均有抑制作用,并有浓度和时间的依赖性;ATRA在50μmol/l和10μmol/l对SMMC-7721细胞作用6天后的抑制率分别为71.47%、53.37%,随浓度的增加抑制作用增强;经ATRA作用后SMMC-7721细胞形态上出现凋亡的变化;ATRA作用6天后细胞凋亡比率分别为高浓度组42.89%,低浓度组8.53%,ATRA浓度越大诱导细胞凋亡的作用越强;经ATRA作用的SMMC-7721细胞G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,流式细胞仪检测出凋亡峰;RT-PCR结果显示ATRA作用组与对照组之间SMMC-7721细胞survivin mRNA表达无显著性差异;Western-blot结果示SMMC-7721细胞在ATRA作用后survivin蛋白表达下降,浓度越大作用越明显,在高浓度组survivin蛋白表达甚至几乎完全受抑制;免疫细胞化学也表明survivin蛋白表达下调且具有剂量依赖性。结论: Survivin在人肝癌细胞株SMMC-7721中高表达,ATRA能够在体外诱<WP=5>导肝癌细胞凋亡并抑制肝癌细胞增殖,ATRA促进人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的机制之一可能是通过调控survivin基因产物的表达。