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研究目的:乳腺癌骨癌痛(BCIP)是一种慢性疼痛。由于乳腺癌患者存活期不断延长,因此骨癌痛的发生比例也在不断的提升。然而,骨癌痛的发生发展机制尚不清楚,并且临床治愈的可能性较小。最近有研究表明,趋化因子CXCL9在人类恶性肿瘤、炎症的发生过程中起重要作用。前期共表达谱芯片结果提示,CXCL9上游可能由长链非编码RNA(lncRNA)所调控。LncRNA被认为在包括细胞周期,凋亡和信号传导途径等各种生物学过程中起着关键作用。根据芯片预测,LncRNA-NONRATT021203.2与CXCL9之间存在相关性。因此,证明lncRNA-NONRATT021203.2是否通过调控CXCL9的表达参与BCIP的发展是我们的主要研究方向。实验方法:1.使用带有23号针头的10μL微型注射器将大鼠乳腺癌细胞Walker 256注射到180-200 g SD雌性大鼠的胫骨腔中来建立BCIP模型。2.Von Frey细丝对BCIP大鼠进行静态机械刺激的缩爪阈值(PWT)检测,热痛仪对BCIP大鼠进行辐射热的缩爪潜伏期(PWL)检测。3.鞘内注射CXCL9-siRNA以验证CXCL9在BCIP发生发展过程中的作用。4.RT-PCR检测CXCL9和其他相关lncRNA的表达水平。5.ELISA检测BCIP大鼠患肢相关DRGs中的CXCL9的蛋白表达。6.IF(immunofluorescence)和 FISH(fluorescence in suit hybridization)实验检测CXCL9 在 BCIP 大鼠 L2-L5 DRGs 中的分布以及 lncRNA-NONRATT021203.2 和CXCL9的共定位。实验结果:1.与对照组(CON)大鼠相比,BCIP大鼠表现出明显的痛觉过敏。BCIP大鼠患肢相关DRGs中CXCL9的mRNA和蛋白表水平达明显升高。2.鞘内注射CXCL9的小干扰RNA(siRNA)可明显减轻BCIP大鼠痛觉过敏现象。3.CXCL9在BCIP大鼠L2-L5 DRGs中主要表达于中小神经元。4.与 CON 大鼠相比,BCIP 大鼠 L2-L5 DRGs 中 lncRNA-NONRATT021203.2 显著升高。5.鞘内注射lncRNA-NONRATT021203.2-siRNA可显著减轻BCIP大鼠的痛觉过敏反应。6.CXCL9 和 lncRNA-NONRATT021203.2 在 BCIP 大鼠 L2-L5 DRGs 的相同神经元上共表达。鞘内注射 lncRNA-NONRATT021203.2-siRNA 后,BCIP 大鼠 CXCL9 mRNA和蛋白水平明显降低。实验结论:LncRNA-NONRATT021203.2通过上调CXCL9的表达参与骨癌痛的调控,这为我们治疗肿瘤引起的骨转移痛提供新的治疗靶点和依据。