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酶是一种生物催化剂,游离酶存在的缺点已经不能适应现代工业生产的需要,固定化材料的选择是固定化酶研究的重点。交联聚乙二醇二丙烯酸酯是一种高分子聚合物材料,性质温和,吸水性强,其独特的结构和性能使其可能成为漆酶固定化的潜在载体。以聚乙二醇(600,6000,20000)为原料采用醇-酰氯法合成了不同分子量的聚乙二醇二丙烯酸酯(polyglycol diacrylate),进一步在偶氮二异丁腈引发下得到交联聚乙二醇二丙烯酸酯(cross-linked polyglycol diacrylate)载体,并研究了载体对漆酶的固定化效果。结果表明:交联PEG(20000)DA对漆酶的固定化效果最好;最佳交联条件为:交联剂浓度为0.5%,交联温度为175℃,交联时间为30min。对漆酶固定化优化的最佳条件为:pH为3.5的缓冲液稀释103倍的漆酶溶液,固定4h,4℃下静置15h,加酶液量为30mL/0.1g载体,此时漆酶在载体上的负载量为0.792mg/g。固定化漆酶最适温度为60℃;最适pH为3.5;米氏常数为3.37×10-4mol/L;酶活为54.57U/(g·min),即单位质量漆酶的活性为68.90U/(mg·min);固定化效率为54.3%。结果表明,固定化漆酶在不同的pH值下放置1h,当pH值在35时酶活保留在80%以上;使用7批次的固定化漆酶的酶活回收达到60%以上,其他批次酶活损失很少;放置20天的样品,固定化漆酶酶活基本没变;70℃下进行固定化漆酶的热稳定性测试,发现随着时间延长,固定化漆酶的活性比游离漆酶下降速率要慢得多,说明热稳定性得到了有效提高。采用固定化漆酶对2,4-二氯苯酚进行降解实验,研究了pH值、底物浓度和酶量以及时间对降解的影响。实验表明,固定化漆酶降解2,4-二氯苯酚的最适pH为6.5;底物浓度为20mg/L时降解24h效果最好,降解率达到85%;当固定化酶质量:酚质量=143:1(蛋白质量:酚质量=1:8.889)时,24h内的降解效率最高;固定化漆酶对2,4-二氯苯酚的降解效率要高出游离漆酶10倍以上。