论文部分内容阅读
乳腺是哺乳动物特有并具有重要经济价值的器官，其发育及泌乳调控与其泌乳生产能力是密不可分的。众多基因参与了乳腺发育及泌乳调控。钠碘转运体(Na+/I-Symporter，NIS)是一种与乳腺发育及泌乳调控相关的基因，其主要表达在乳腺的多房型棘球囊基底膜和小导管上皮细胞上，是一种转运膜蛋白，主要起到对碘的吸收和聚集作用。NIS在乳腺组织中对碘的吸收和聚集作用，可应用于新生儿甲状腺激素的生物合成。本实验以昆明鼠作为乳腺发育的动物模型，对其青春期、妊娠期、泌乳期和退化期乳腺组织中的NIS基因进行Western blot分析、免疫组织化学定位及半定量PCR检测。经SDS-PAGE检测及Western blot分析显示，4个时期乳腺组织中均有NIS蛋白的表达，在分子量大小约为65KDa处出现了特异性的杂交条带，表明小鼠乳腺组织中表达的蛋白为NIS蛋白；免疫组织化学检测表明，NIS主要表达在乳腺的小导管上皮细胞和基底外侧膜上，在泌乳期乳腺中的表达最为明显。4个时期乳腺组织中NIS蛋白的表达量呈现出有规律的变化，即从青春期到妊娠期逐渐增加，到泌乳期达到高峰，而后在退化期又逐渐下降，回复到与青春期表达量相似的状态；提取乳腺组织总RNA并纯化，采用RT-PCR方法扩增NIS基因，再利用半定量PCR技术，对4个发育时期的昆明鼠乳腺组织中NIS基因进行量化分析，结果显示，NIS基因在小鼠青春期和退化期的乳腺组织中表达量极低，妊娠期较高，泌乳期最高。经SPSS软件分析表明，NIS在乳腺组织妊娠期和泌乳期间表达水平差异显著（P<0.05），且该两个时期NIS表达水平均与青春期和退化期差异显著（P<0.05），但青春期和退化期间表达水平差异不显著。本研究对与乳腺发育密切相关的NIS基因进行研究，将为乳腺发育和泌乳的调控提供基础研究材料，也将为与NIS相关多种疾病的临床治疗提供实验依据。