【摘 要】
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目前,不同种类的抗生素在临床和动物养殖业中被广泛使用,导致了多重耐药细菌的产生。细菌抗生素耐药性由抗生素抗性基因引起,土壤和水体环境中存留的耐药基因已经被认为是一种新型的污染物,但在食品中抗性基因的污染对人类健康的影响更为直接,奶酪作为在中国市场上逐渐兴起的一款即食食品,其加工过程中通常会添加发酵菌,微生物多样性比较丰富,然而目前对其中抗生素抗性基因的存留情况仍鲜有研究。因此,本文利用荧光定量PC
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目前,不同种类的抗生素在临床和动物养殖业中被广泛使用,导致了多重耐药细菌的产生。细菌抗生素耐药性由抗生素抗性基因引起,土壤和水体环境中存留的耐药基因已经被认为是一种新型的污染物,但在食品中抗性基因的污染对人类健康的影响更为直接,奶酪作为在中国市场上逐渐兴起的一款即食食品,其加工过程中通常会添加发酵菌,微生物多样性比较丰富,然而目前对其中抗生素抗性基因的存留情况仍鲜有研究。因此,本文利用荧光定量PCR技术对国内市场上热销的23款奶酪制品中8大类抗生素:β-内酰胺类抗生素、氨基糖苷类抗生素、四环素类抗生素、FCA(氟喹诺酮、喹诺酮、氟苯尼考、氯霉素和酰胺醇)类、大环内酯类-林可酰胺类-链阳菌素B类、万古霉素类、磺胺类和一些还没有准确定义的种类(其他类)抗性基因存留情况进行了检测,并且对这些奶酪中的细菌多样性以及奶酪中优势细菌的多重耐药性进行了分析,结果显示:奶酪样品中除万古霉素类抗性基因外,其余7大类抗生素的抗性基因均可在所有奶酪样品被高丰度检测出来。17个干酪样品中共检出223个ARGs,6个再制干酪样品中共检出52个ARGs。再制干酪中抗生素抗性基因检出率前两位的是氨基糖苷类(17.5%)和四环素类(12%),天然干酪中抗生素抗性基因检出率前两位的是FCA类(56%)和氨基糖苷类(52%),天然奶酪再加工制成的再制奶酪中各大类抗性基因的检出丰度均明显低于天然奶酪。利用高通量测序手段分析奶酪中细菌微生物多样性,结果显示,各类奶酪发酵菌分属厚壁菌门的乳球菌属(Lactococcus)、链球菌属(Streptococcus)和乳杆菌属(Lactobacillus)、明串珠菌属(Leuconostoc)和肠球菌属(Enterococcus),以及放线菌门的丙酸菌属(Propionibacterium)和变形菌门的柠檬酸杆菌属(Citrobacter)。利用传统培养的方式从不同来源奶酪中分离出25株细菌,结合QPCR检出的高丰度耐药基因挑选对应抗生素对25株活菌进行耐药性检测,结果证实分离菌普遍存在多重耐药,所有细菌耐药率较高的前两种分别是磺胺恶唑(95%)、卡那霉素(85%),敏感率较高的前两种药物依次是氨苄西林(95%)、四环素(85%),并且普遍显示耐药的抗生素相关抗性基因均可高丰度的在细菌中被检测到。综上,奶酪是耐药基因存留度较高的即食食品,虽然奶酪中的活菌多为益生菌,但仍存在多重耐药的状况,因此,鉴于奶酪在我国日益增长的消费量,对其中耐药基因以及耐药菌的检测应当引起足够重视。
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