红树植物内生真菌生物活性及菌株A-1-2-3次级代谢产物的初步研究

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近年来,随着研究热点的转移,新药的研究开发已突破了陆生资源的束缚,拓展到了生态和物种远比陆地生境复杂多样的海洋。红树植物生长于海岸潮间带,其独特的生存环境赋予它丰富的微生物资源,是当前倍受重视的药用新资源。本文对福建省九龙江口浮宫镇草埔头红树林区木榄(Bruguiera gymnorrhiza)和秋茄(Kandelia candel) 2种红树植物的内生真菌资源进行为期1年的种群动态调查并对这些菌株的抗菌、抗肿瘤、乙酰胆碱酯酶及胰蛋白酶抑制剂活性进行了初步研究。对活性菌株A-1-2-3的代谢产物进行分离纯化并对分离得到的化合物进行结构鉴定和生理活性研究,为深入开发和保护红树植物内生真菌药用资源提供理论依据,并期望得到有开发前景的候选药物先导化合物。从2种红树植物的树叶、树皮和树根样品中分离到290株内生真菌。对其种群动态进行初步考察,结果显示,木榄和秋茄内生真菌数量高峰期分别为4月份和10~12月份;青霉(Penicillium)、交链孢(Alternaria)、Diaporthe和无孢目(the nonsporulating groups)是秋茄中的主要优势属;木榄内生真菌主要优势属为头孢霉(Cephalosporium)、交链孢、青霉等。不同宿主对内生真菌的季节分布有重要的影响。以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphlococcus aureus)、白色假丝酵母(Candida albicans)、黑曲霉(Aspergillus niger)为指示菌,采用琼脂扩散法对这些菌株进行抗菌活性检测,共筛选得到活性菌株40株,占总菌株数的13.8 %;采用MTT法对其体外抗肿瘤活性进行检测,发现17株内生真菌对KB(人口腔上皮癌)和/或Raji(人B淋巴瘤)细胞具有抑制作用,占总菌株数的5.9 %。生物活性菌株分布于青霉、交链孢、拟青霉、无孢目等10个不同的分类单元中,2种宿主植物内生真菌抗菌及抗肿瘤活性均有不同程度的季节差异性。菌株A-1-2-3分离自秋茄植物的叶子,经分子鉴定为一株拟茎点霉(Phomopsis sp.)。本文采用固体培养、有机溶剂提取、分相萃取、柱层析、和重结晶等分离纯化方法从其发酵产物中分离到9个纯的化合物(Y6,A4,A3,Y29,Y10,A5,Y9,A1和SRS39),并采用核磁共振(NMR)波谱解析结合电喷雾质谱(ESI-MS)的方法鉴定其结构,经数据库搜索,发现有5个结构
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