手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)是婴幼儿人群中一种常见的传染病,在世界范围内广泛流行。柯萨奇病毒A组16型(Coxsakievirus A16,CV-A16)是HFMD的主要病原体之一,近年来多次在亚太地区引起HFMD的暴发。CV-A16感染可引起手、足、口等部位疱疹,咽颊炎,无菌性脑膜炎等症状,严重者可导致心肌炎、肺炎等甚至死亡。然而针对CV-A16感染引起的HFMD,目前无特异性的治疗药物及疫苗上市。单克隆抗体(Monoclonal antibody,MAb)由于靶向性高、低毒性等特点广泛应用于临床诊断、治疗与疫苗评价。本研究收集了共28株CV-A16单抗(5株中和性单抗,23株非中和性单抗),从中筛选到中和性单抗和非中和性单抗各1株,分别为NA11F12和MAb 19。研究结果显示NA11F12具有高特异性,能够结合并中和A、B1、B2、C亚型的CV-A16毒株。NA11F12在体内可发挥保护作用,保护效果具有剂量依赖性和时间依赖性。在BJCA08/CV-A16攻击BALB/c乳鼠后1d,0.0042μg/g的NA11F12可保护50%的乳鼠存活。在攻毒后4d,10μg/g NA11F12能够保护100%乳鼠存活;攻毒后的第5d、6d和7d,NA11F12治疗存活率分别达80%、60%和20%。病理学检测结果显示NA11F12能够阻止CV-A16在乳鼠心脏、脑及腿部肌肉中的复制从而阻止CV-A16介导的多种炎症的发生。使用肽扫描技术发现其表位位于CV-A16 VP1区的GDPIADMIDQTV(1~12aa),是影响病毒RNA释放的关键位点。中和性抗体是抗病毒感染能力及评价疫苗有效性的重要指标,但非中和抗体也具有保护作用。非中和MAb19能够交叉结合不同亚型的CV-A16毒株。MAb19可发挥保护作用,保护效果与单抗剂量呈现效应关系,BALB/c乳鼠感染致死剂量BJCA08/CV-A16后1d,3.65μg/g的MAb19可保护50%的乳鼠。病理学检测结果显示MAb19能够阻止CV-A16在乳鼠心脏、脑及腿部肌肉中的复制及CV-A16介导的多种炎症的发生。使用噬菌体展示技术鉴定其表位位于VP2区域的ENSHPPY(142~148aa)。进一步的保护机制研究发现,MAb19通过促进巨噬细胞对CV-A16的吞噬发挥保护作用。研究发现中和性单抗NA11F12具有良好的动物保护效果,并通过肽扫描技术发现一个CV-A16中和性表位,位于VP1区的1~12aa。非中和MAb19也具有保护效果,研究发现其依赖ADCP发挥保护作用,其表位位于VP2区142~148aa。研究结果为CV-A16的治疗性药物、疫苗研发及诊断提供了基础。