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泰和乌骨鸡是江西重要的特色药食资源，与普通鸡相比，其最显著的特点是其体内含有丰富的黑色素，黑色素是乌骨鸡发挥其药用滋补功效的重要物质基础。在哺乳动物和人类研究证实α-MSH（α-黑色素细胞刺激素，α-melanocyte stimulating hormone）－MC1R（黑素皮质素受体1，melanocortin1receptor）－cAMP－TRP（酪氨酸酶相关蛋白，tyrosinase-related protein）通路在黑色素的合成中发挥重要作用。α-MSH是调节黑色素形成的重要因子，MC1R是调节黑色素合成的关键基因，而cAMP信号通路是调节黑色素合成的关键通路。然而，α-MSH－MC1R－cAMP－TRP通路中相关信号分子在泰和乌骨鸡组织黑色素合成中的作用的研究报道还未见。本试验从20日龄泰和乌骨鸡胚胎背部皮肤中分离黑色素细胞，对其进行体外培养，利用体外培养的泰和乌骨鸡皮肤黑色素细胞研究了α-MSH以及cAMP作为α-MSH－MC1R下游信号分子对泰和乌骨鸡皮肤黑色素细胞增殖及黑色素生成的影响。试验结果如下：（1）用Dispase Ⅱ+胰蛋白酶两步消化法处理泰和乌骨鸡鸡胚皮肤分离黑色素细胞可获得较好的分离效果。培养液中添加碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblastgrowth factor，bFGF）和霍乱霉素（cholera toxin，CT）可协同促进黑色素细胞的生长。分离纯化的细胞经形态学观察、L-Dopa和抗S-100蛋白染色鉴定其为黑色素细胞。（2）不同剂量（2.5～10μg/ml）的α-MSH不同程度地促进泰和乌骨鸡皮肤黑色素细胞的增殖、提高细胞酪氨酸酶（tyrosinase，TYR）活性和cAMP含量并促进黑色素的合成，以2.5μg/ml的α-MSH对乌骨鸡皮肤黑色素细胞增殖和黑色素合成的促进作用最大（P<0.05或P<0.01）。α-MSH剂量依赖性地提高乌骨鸡皮肤黑色素细胞黑素皮质素受体1（rne1anoeortin-1receptor，MC1R）基因表达。α-MSH拮抗剂预处理乌骨鸡皮肤黑色素细胞显著抑制α-MSH对黑色素细胞TYR活性、cAMP含量、MC1R基因表达及黑色素合成的上调作用（P<0.05）。α-MSH在泰和乌骨鸡组织黑色素细胞的增殖及黑色素的合成中发挥重要作用。（3）不同浓度的cAMP（1×10-5、1×10-4、1×10-3mol/L）均极显著提高泰和乌骨鸡皮肤黑色素细胞TYR活性（P<0.01），以1×10-4mol/L组最为显著。不同浓度的cAMP不同程度地促进黑色素细胞黑色素的合成，以1×10-4mol/L组最为显著（P<0.01）。cAMP抑制剂RP-c-AMPS预处理黑色素细胞显著抑制cAMP（1×10-4mol/l）作用下酪氨酸酶活性（P<0.01）和黑色素含量的升高（P<0.05）。cAMP抑制剂RP-c-AMPS和AC（adenylate cyclase，AC）抑制剂NKY80预处理黑色素细胞均显著抑制α-MSH（2.5μg/ml）引起的TYR活性、cAMP含量和黑色素含量升高的作用（P<0.01或P<0.05）。cAMP作为α-MSH－MC1R信号通路中的第二信使或下游信号分子在泰和乌骨鸡皮肤黑色素细胞黑色素的合成中发挥重要作用，其浓度的升高可提高泰和乌骨鸡皮肤黑色素细胞酪氨酸酶活性以及黑色素含量。综上所述，α-MSH在泰和乌骨鸡黑色素细胞的增殖及黑色素的合成中发挥重要作用，而cAMP作为α-MSH－MC1R信号通路的下游信号分子在介导α-MSH促进泰和乌骨鸡皮肤黑色素细胞黑色素合成中发挥着重要的调控作用。