目的本实验研究模拟田径运动中周期性耐力跑的形式,以建立长期递增负荷训练的运动性闭经大鼠模型,分析运动对雌性大鼠动情周期抑制的情况,相关脏器的变化,以及分析运动对大鼠生殖内分泌和大鼠HPOU轴、HPA轴的影响,从而理解运动性月经失调和闭经的产生机制,进而推断运动对女性月经、女性HPOU轴和HPA轴的影响。深入探讨针灸是否能够调节运动性月经失调甚至运动性闭经,以及其调节作用的机制,为防治因大强度运动导致的运动性闭经在实验和临床中提供新的思路和方法。同时比较不同针灸方法对运动性闭经大鼠的调节作用,探索较佳针灸方法,以更好地发挥针灸在竞技运动训练中的实际作用。方法将清洁级16周龄健康雌性SD大鼠45只随机分为正常对照组、递增负荷跑台训练组(造模组)、递增负荷跑台训练加电针组、递增负荷跑台训练加艾灸组和递增负荷跑台训练加电针艾灸组。每组9只,以长期递增负荷跑台训练建立运动性闭经大鼠模型,并分别给予相关组别电针、艾灸或者电针结合艾灸的治疗方法,实验结束前后观察阴道脱落细胞的前后变化情况,采用放射免疫法测定血清E2、P、FSH、LH、T、Cort水平,测量并计算子宫、卵巢脏器系数、垂质比和心质比,观察长期递增负荷跑台训练对大鼠动情周期、相关脏器和生殖内分泌的影响,以及针灸前后脏器、生殖内分泌和“下丘脑—垂体—卵巢—子宫轴”的变化及其相互协调关系的影响。结果1、阴道脱落细胞检查每天在显微镜下观察大鼠阴道脱落细胞,运动前各组大鼠均有相对稳定的动情周期,当运动至第7周,造模组大鼠的阴道涂片观察到动情前期有核上皮细胞和角化细胞减少；动情期角化细胞逐渐明显减少,涂片中较少出现大片角化细胞脱落；动情间期白细胞、黏液增多,整个动情周期出现不规律,表现为动情期逐渐缩短,动情后期、动情间期延长,甚至长期处于动情间期,递增负荷训练大鼠出现动情周期抑制现象。2、生殖内分泌检查(1)造模组血内雌激素(E2)水平明显低于对照组(P<0.05)；经治疗后,艾灸组大鼠血内E2水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)艾灸组和电针组大鼠血内孕酮(P)水平显著高于对照组和造模组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)与对照组比较,造模组大鼠血内雄激素(T)水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)；与造模组比较,电针加艾灸组T水平显著提高,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)与对照组比较,艾灸组、电针加艾灸组和电针组大鼠血内促卵泡激素(FSH)水平显著提高,差异有统计学意义(P<0.01)；与造模组比较,艾灸组和电针组大鼠血内FSH水平显著提高,差异有统计学意义(P<0.05)。(5)与对照组比较,艾灸组、电针加艾灸组和电针组大鼠血内黄体生产素(LH)水平均显著提高,差异有统计学意义(P<0.01)；与造模组比较,艾灸组、电针加艾灸组和电针组大鼠血内LH水平均显著提高,差异有统计学意义(P<0.01)。3、大鼠脏器系数(1)艾灸组与电针加艾灸组的子宫脏器系数有显著性差异(P<0.05)。(2)与对照组比较,造模组的垂质比显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)；与造模组比较,艾灸组和电针组的垂质比显著减少,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)与对照组比较,艾灸组和电针加艾灸组心质比显著提高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1、持续递增负荷训练使雌性大鼠E2水平和T水平显著降低,表明长期递增负荷训练影响了大鼠正常的动情周期,说明持续高强度的运动对卵巢功能有抑制作用,因此持续高强度的运动对HPOU轴的外周端产生影响。2、在电针和电针结合艾灸的治疗过程中提高了大鼠E2的水平,而电针结合艾灸治疗使大鼠E2的水平接近于正常大鼠,确定电针结合艾灸的治疗方法对生殖激素具有调节作用。3、艾灸和单独电针的治疗方法对长期递增负荷训练后的大鼠的P、FSH和LH水平有显著提高。电针加艾灸的治疗方法能够显著提高长期递增负荷训练后大鼠的LH水平和T水平。4、电针对提高大鼠P和FSH水平最为有效,而艾灸的方法对大鼠LH水平最为有效,电针加艾灸的综合方法对改善大鼠T水最为有效,说明针灸能够从不同角度维持整个生殖内分泌水平的平衡。5、持续递增负荷运动是从HPOU轴外周腺体—卵巢开始,从调节卵巢的分泌激素功能开始影响神经内分泌功能的。而电针和艾灸等干预手段,是通过刺激经络和调节中枢神经发挥作用,其首先影响HPOU轴的中枢顶端位点,调节下丘脑和垂体功能,影响促性腺激素释放激素GnRH脉冲,即从LH、FSH改变,再逐渐影响HPOU轴的外周腺体—卵巢功能,继而影响E2和T水平。因此,针灸发挥调节作用的位点恰恰与持续高强度训练的位点相反。针灸的手段能有效地影响卵巢和垂体功能,调节内分泌水平,影响月经来潮,这可能是针灸对运动性闭经调节作用的机制之一。