创伤弧菌(Vibrio vulnificus)是湖泊和海洋中广泛分布的一种病原菌,它能引起原发性败血症和软组织感染。所以创伤弧菌的检测技术逐渐引起国内外越来越多学者的高度关注。本课题主要从以下几个方面寻找适合创伤弧菌生长的选择性培养基：增菌培养基的优化,生长促进因子和抗菌药物的筛选,混合指示剂的研究。实验结果如下：1实验以不同的培养温度、起始pH,氯化钠,蛋白胨,酵母浸膏为研究对象,分析了对创伤弧菌生长的影响。在此基础上利用Design Expert7.1.6软件对RSM法实验结果进行了优化,得到的最优菌培养基组合为：蛋白胨6.0g/L,牛肉膏1.0g/L,酵母浸膏4.0g/L,NaC110g/L, FePO4-4H2O0.01g/L, pH7.5。2通过单因素实验确定当氯化钾的添加量为0.01%和硫酸镁的为0.03%时最有利于创伤弧菌的生长。药敏试验结发现多粘菌素E和多粘菌素B对创伤弧菌不敏感,以各种抗菌药物对创伤弧菌的最小抑菌浓度和抗菌谱差异,最终选定多粘菌素E和多粘菌素B作为创伤弧菌的抗菌添加药物,其浓度分别为100μ g/ml和40μg/ml。3创伤弧菌能分解培养基中纤维二糖产生小分子的有机酸,改变培养基的pH值。单一的指示剂存在变色pH范围宽或变色不够灵敏等缺点,因此优化了混合指示剂。将溴百里香酚蓝与溴钾酚紫、甲酚红、溴甲酚绿、甲基橙、溴酚蓝五种指示剂按照不同的比例混合组成混合指示剂,单因素实验结果表明,溴百里酚蓝与溴甲酚绿的混合指示剂的显色效果要优于其他组合,氯酚红与溴钾酚紫按1：2时变色的效果最好,变色的pH范围为4.31-5.47,颜色的变化为由黄色变为蓝色。单因素实验确定其在培养基中的最佳添加量为1.0%(v/v)。4根据前三章的实验结果,确定创伤弧菌的选择性培养基(WSM)的成分及培养条件,该培养基可特异性的分离创伤弧菌,在此培养基上培养24h左右,创伤弧菌呈现黄色菌落。本课题研究的WSM培养基快速检测创伤弧菌是可行的,并且较传统方法有更高的检测效率,操作更加简便,结果更易于观察,特别是在仪器设备条件不高的基层易于推广,有很高的实用价值。