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轮状病毒(RV)能够引起人类、哺乳动物类、禽类腹泻,其中A组RV是引起婴幼儿急性胃肠炎的主要病原体。完整的RV共有三层衣壳,其基因组包裹在同心衣壳蛋白组成的二十面体颗粒中,由11个分节段的双链RNA组成。RVVP6蛋白位于病毒的中间层衣壳,既是病毒含量中最丰富的蛋白,也是RV的组抗原蛋白。VP6蛋白氨基酸序列具有高度保守性,并具有较强的抗原交叉反应性：RV VP4和VP7是主要的中和抗体原蛋白。VP4蛋白在病毒外壳形成刺突样结构,能独立诱导机体产生中和抗体。目前上市的RV疫苗均为减毒活疫苗,这些疫苗虽有其优势,也有一定潜在的不足,开发安全有效的新型疫苗仍具有重要意义。本研究选取VP4蛋白上具有高度保守性和抗原交叉反应性的第296-313位和第381-401位氨基酸抗原表位进行重组抗原表位嵌合蛋白研究。采用基因工程技术,成功构建A组人RV TB-Chen株VP6载体蛋白,将上述两个抗原表位分别插入VP6蛋白载体基因同一位点,构建重组表达质粒,在大肠杆菌(E.coli)细胞中成功表达出两个在VP6载体蛋白表面携带有VP4中和抗原表位的重组嵌合蛋白。表达的嵌合蛋白可与相应抗体发生特异性反应；可诱导豚鼠产生特异性血清抗体；抗嵌合蛋白血清抗体可特异性识别载体蛋白VP6F, Wa株病毒的VP6和VP4蛋白,可中和Wa株病毒在MA104细胞上的感染性。结果表明,所构建和表达的两个以VP6为载体的VP4抗原表位嵌合蛋白具有较高抗原反应性和免疫原性；嵌合蛋白携带的VP4抗原表位具有增强载体蛋白免疫原性作用。本研究为研制新型RV重组蛋白疫苗的奠定较好基础。