PARP-1调控卵巢癌上皮—间质转化、增殖、迁移作用的研究

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第一部分上皮性卵巢癌组织中PARP-1的表达及其与EMT的关系研究目的:研究上皮性卵巢癌组织(epithelial ovarian cancer, EOC)中聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1 (PARP-1)的表达及其与上皮-间质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition, EMT)的关系。研究方法:免疫组化、实时荧光定量PCR、Western Blotting法检测EOC和良性卵巢肿瘤组织中PARP-1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、转录调控因子Snail的表达。结果:PARP-1、 vimentin、Snail在EOC中阳性表达率高于良性卵巢肿瘤组织,而E-cadherin则相反,差异均具有统计学显著性(P<0.05)。PARP-1、 E-cadherin、 vimentin、Snail与EOC的病理分级、临床分期和有无淋巴结转移有关(P<0.05),与年龄和病理类型无关(P>0.05)。 E-cadherin表达与PARP-1表达呈负相关(P<0.05), vimentin、Snail表达与PARP-1表达呈正相关(P<0.05)。 EOC中PARP-1、 vimentin、Snail的蛋白、mRNA相对表达量高于良性卵巢肿瘤组织,E-cadherin的蛋白、mRNA相对表达量低于良性卵巢肿瘤组织,差异均具有统计学显著性(P<0.05)。结论:PARP-1通过调控E-cadherin、vimentin、Snail的表达促进EOC上皮-间质转化。PARP-1及其参与的上皮-间质转化在EOC进展中发挥重要作用。第二部分HGF/PARP-1信号通路调控上皮性卵巢癌细胞SKOV3上皮间质-转化、增殖、迁移作用的研究研究目的:研究肝细胞生长因子/聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(HGF/PARP-1)信号通路在上皮性卵巢癌细胞SKOV3上皮-间质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition, EMT)、增殖和迁移中的作用。研究方法:RNA干扰技术干扰人卵巢癌细胞系SKOV3 PARP-1基因表达并用HGF处理干扰后的细胞。Western blotting法检测处理后细胞波形蛋白(vimentin)、转录调控因子Snail蛋白表达水平。MTT法、划痕实验检测HGF/PARP-1信号通路在上皮性卵巢癌细胞SKOV3增殖和迁移中的作用。结果:RNA干扰可有效降低卵巢癌细胞中PARP-1的表达水平。HGF可提高卵巢癌细胞中vimentin和Snail蛋白的表达,促进卵巢癌细胞EMT进展。干扰PARP-1表达部分抑制HGF刺激的EMT过程,逆转卵巢癌细胞EMT。在功能学实验中,HGF促进卵巢癌细胞的增殖和迁移,病毒转染干扰PARP-1表达部分抑制HGF对SKOV3细胞增殖和迁移的促进作用。结论:HGF/PARP-1通过诱导EMT发生,增强细胞增殖和迁移能力,促进人卵巢癌细胞的发生发展。PARP-1是卵巢癌靶向治疗的一个新靶点。
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