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热应激使家畜采食量减少,机体营养代谢消耗增加和免疫力下降,造成家畜生长性能和繁殖性能的降低,给畜牧生产造成巨大的经济损失。通过营养调控手段,缓解热应激对动物造成的负面影响,已受到越来越多学者的关注。本试验利用小鼠热应激模型研究热应激对小鼠肝脏抗氧化功能的影响,并研究热应激小鼠肝脏组织中Keapl-Nrf2/ARE通路相关基因的表达水平。另外,探讨是否可以通过添加抗氧化剂TBHQ来增强小鼠肝脏的抗热应激能力。试验一：热应激对小鼠肝脏抗氧化功能的影响。选用30只8周龄雄性小鼠,每天在相同时间(11：00至13：00)将小鼠置于恒温生化培养箱(温度42℃,相对湿度60%)中2h。分别在热处理第Id、2d、4d、8d和12d时处死小鼠,取出肝脏,检测各项指标,结果显示：热处理后小鼠的体表温度和直肠温度都极显著高于热处理前(P<0.01)。热处理第1d和2d时,肝脏器官指数相对于热处理前都极显著升高(P<0.01),热处理还导致小鼠肝脏组织充血和肝细胞水肿增大,说明热处理引起了小鼠的热应激。相对于热处理前,小鼠肝脏组织的MDA含量在热处理第2d和8d显著升高,GSH含量、GSH-PX活力和总SOD活力在第4d和12d显著升高,肝脏组织的抗氧化系统和氧化系统在不断的相互作用。相对于热处理前,Keapl基因的表达量从热处理第1d开始显著降低,Nrf2基因的表达量在第4d和12d显著升高,HO-1基因的表达量在第1d显著升高,NQO1和GCLC基因的表达量在第1d和4d显著升高。热处理第1d、2d、4d和8d检测到Nrf2蛋白在肝细胞细胞质表达。Keapl-Nrf2/ARE通路相关基因的表达被激活,肝脏自身的抗氧化系统开始调节热应激引起的氧化损伤。试验二：日粮添加TBHQ对热应激小鼠肝脏氧化损伤的缓解作用。将35只6周龄雄性小鼠随机的分成2组：基础组和TBHQ组。基础组饲喂基础日粮,TBHQ组饲喂添加1%TBHQ的日粮,2周后TBHQ组进行热处理,处理同试验一。试验结果显示：TBHQ组中,热应激第1d时,小鼠的肝脏器官指数相对于热应激前极显著升高(P<0.01)；热应激第2d、4d和8d时,肝脏组织的显微结构和热应激前比较没有显著差异,相对于试验一的结果,说明日粮添加TBHQ对肝脏具有一定的保护作用。热应激前,TBHQ组小鼠肝脏组织的GSH-PX活力和总SOD活力显著高于基础组,Keapl基因的表达量显著低于基础组,肝细胞细胞质检测到Nrf2和HO-1蛋白的表达,说明日粮添加TBHQ提高了肝脏组织的抗氧化水平。相对于热应激前,TBHQ组小鼠肝脏组织的GSH含量在热应激第2d降低,GSH-PX活力在第1d、2d和4d降低,日粮添力口TBHQ降低了肝脏组织的氧化损伤,肝脏组织的抗氧化酶活性没有显著升高。相对于热应激前,TBHQ组小鼠肝脏组织的Nrf2基因的表达量在热应激第1d和8d显著升高,HO-1基因的表达量在第1d和4d显著升高,NQO1基因的表达量在第1d、2d和8d显著升高,GCLC基因的表达量在第1d显著升高,说明Keapl-Nrf2/ARE通路相关基因的表达在热应激条件下被迅速激活。综上所述,日粮添加TBHQ提高了小鼠肝脏的抗氧化水平,降低了热应激引起的肝脏氧化损伤。基因水平的检测显示,TBHQ可能是通过激活Keapl-Nrf2/ARE通路的表达来实现抗氧化的。