分泌型免疫球蛋白A(SIgA)是乳中非常重要的免疫球蛋白,是消化道黏膜免疫的主要效应因子,同时也具有免疫清除、免疫调节、启动免疫学活性等多种功能,可以抵御病原菌与上皮表面相粘附,提高局部抗感染的能力以及中和病毒的作用。SIgA含量和抗体活性等的改变会引起许多疾病的产生,如若乳中SIgA减少,婴儿易感染致病性大肠杆菌:SIgA减少会引起肠道中菌群失调;黏膜SIgA的降低会导致胃肠道、呼吸道等反复感染性疾病等。因此准确有效的检测血清和外分泌液中SIgA的含量对探索肠腔中SIgA独特作用和完善SIgA在肠道黏膜免疫中的机制有着重要的意义。本研究旨在针对猪初乳汁中含有大量的分泌型免疫球蛋白A特点,采用两步盐析沉淀法,对猪初乳中的SIgA进行粗提,再经凝胶层析以及纤维素层析相结合的方法进行纯化SIgA;利用猪分泌型免疫球蛋白A定量检测试剂盒和BCA蛋白浓度测定试剂盒相结合,检测和鉴定所纯化的SIgA;得到的SIgA用于免疫新西兰大耳白兔,制备兔抗猪SIgA多克隆抗体。经分离、纯化和鉴定后,获取兔抗猪SIgA抗体。本研究所获得的抗体可用于检测猪肠黏膜组织中主要的分泌因子--免疫球蛋白SIgA存在状况的研究工具,为猪肠道黏膜免疫的研究奠定物质基础。本论文取得如下结果:1.利用30%、50%两步饱和硫酸铵盐析法、Sephadex G-200凝胶层析和离子交换层析技术从猪初乳中粗分离纯化SIgA,经硫酸铵粗提的蛋白过Sephadex G-200凝胶层析柱,经洗脱、层析柱后,经SDS-PAGE以及猪SIgA定量检测试剂盒相结合的方法鉴定,SIgA蛋白浓度为0.792土0.015mg/mL,BCA蛋白浓度测定试剂盒测得总蛋白浓度为0.850土0.021mg/mL,蛋白纯度>90%,可证明从猪初乳中分离纯化出了纯度较高的SIgA。2.鉴定猪初乳中SIgA含有重链、轻链以及分泌片,分子量分别为56 KD、轻链27 KD、分泌片70 KD左右。3.利用所提纯的SIgA,免疫新西兰大耳白兔,制备出兔抗猪SIgA多克隆抗体。其抗体血清效价达到1:32000、琼脂板免疫双扩散法测得抗体血清效价达到1:32,符合标准。4.利用制备的兔抗猪SIgA多克隆抗体,结合免疫组织化学染色的方法,检测出猪小肠黏膜组织中的SIgA的存在情况。