促红细胞生成素对哮喘小鼠的抗炎作用和气道高反应性影响

来源 :延边大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Whding713
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目的:研究促红细胞生成素(erythropoietin, EPO)对哮喘小鼠的抗炎作用和气道高反应性的影响及可能机制。方法:选择6~8周的BALB/c雄性小鼠60只,随机分为6组,每组各10只:A组(正常对照组)、B组(哮喘模型组)、C组(EPO低浓度组)、D组(EPO中浓度组)、E组(EPO高浓度组)、F组(地塞米松组)。B组,用新鲜配制的20μg卵清蛋白(ovalbumin,OVA)+2mg氢氧化铝共0.2ml于第1、8、15天腹腔注射致敏,第22天开始予3%oOVA生理盐水溶液雾化吸入,每天1次,每次30分钟连续7天。A组生理盐水代替卵蛋白进行腹腔注射和雾化吸入。C、D、E、F组也给予OVA进行攻击,步骤同哮喘模型组,第8、11、15、18天分别腹腔注射低浓度(250IU/Kg)、中浓度(1000IU/Kg)、高浓度(2000IU/Kg) EPO,地塞米松(lmg/Kg),第8、15天用OVA攻击前30min腹腔注射EPO及地塞米松。OVA末次攻击后,24小时内用组胺进行支气管激发试验。测定每组小鼠气道阻力,观察是否产生气道高反应性;采用酶联免疫吸附试验(ELJSA法)测定血清中IgE、IL-6、IL-1O, TNF-a的变化;肺组织病理切片观察肺组织病理形态变化。结果:①气道高反应性:哮喘模型组(B组)气道阻力比对照组(A组)高,发生了气道高反应性。哮喘模型组(B组)、低、中、高浓度EPO组(C组、D组、E组)及地塞米松组(F组)在行支气管激发试验后气道阻力比值比A组增高,比较差异有统计学意义(P <0.05); D, E, F组气道阻力低于B组,比较差异有统计学意义(P<0.05),C组气道阻力低于B组,但比较差异无统计学意义(P>0.05);不同浓度EPO组间比较,D、E组气道阻力低于C组,比较差异有统计学意义(P<0.05);D组与E组比较,E组气道阻力比D组降低,但比较差异无统计学意义(P>0.05);C组气道阻力明显高于F组,比较差异有统计学意义(P<0.05);D、E组气道阻力高于F组,但比较差异无统计学意义(P>0.05)。②兔疫球蛋白E (IgE):B, C、D、E、F组小鼠血清IgE的浓度较A组明显增高,与A组比较差异有统计学意义(P<0.01); D、E、F组IgE低于B组,比较差异有统计学意义(P<0.01),C组IgE低于B组,但比较差异无统计学意义(P>0.05);不同浓度EPO组间比较,D、E组IgE低于C组,比较差异有统计学意义(P<0.01),D组与E组比较,E组IgE比D组降低,但比较差异无统计学意义(P>0.05);C组IgE高于F组,比较差异有统计学意义(P<0.01),D、E组IgE高于F组,但比较差异无统计学意义(P>0.05)。③白介素6(IL-6):B, C、D、E、F组小鼠血清IL-6的浓度较A组明显增高,与A组比较差异有统计学意义(P<0.05); D、E、F组IL-6低于B组,比较差异有统计学意义(P<0.05),C组IL-6低于B组,但比铰差异无统计学意义(P>0.05);不同浓度EPO组间比较,D、E组IL-6低于C组,比较差异有统计学意义(P<0.05),D组与E组比较,E组IL-6比D组降低,但比陵差异无统计学意义(P>0.05);C组IL-6高于F组,比较差异有统计学意义(P<0.05),D、E组IL-6高于F组,但比较差异无统计学意义(P>0.05)。④白介素10(IL-10):B、C、D、E、F组小鼠血清IL-10的浓度较A组明显下降,与A组比较差异有统计学意义(P<0.01); D、E、F组IL-10低于B组,比较差异有统计学意义(P<0.05),C组IL-10低于B组,但比较差异无统计学意义(P>0.05);不同浓度EPO组间比较,D、E组IL-10低于C组,比较差异有统计学意义(P<0.05),D组与E组比较,E组IL-10比D组降低,但比较差异无统计学意义(P>0.05);C组IL-10高于F组,比较差异有统计学意义(P<0.05),D、E组IL-10高于F组,但比较差异无统计学意义(P>0.05)。⑤肿瘤坏死因子a (TNF-a):B、C、D、E、F组小鼠血清TNF-a的浓度较A组明显增高,与A组比较差异有统计学意义(P<0.01); D、E、F组TNF-a低于B组,比较差异有统计学意义(P<0.01),C组TNF-a低于B组,但比较差异无统计学意义(P>0.01);不同浓度EPO组间比较,D、E组TNF-a低于C组,比较差异有统计学意义(P<0.01),D组与E组比较,E组TNF-a比D组降低,但比较差异无统计学意义(P>0.01);C组TNF-a高于F组,比较差异有统计学意义(P<0.01),D、E组TNF-a高于F组,但比较差异无统计学意义(P>0.01)。⑥肺组织病理切片中可以观察到B组血管及气管周围大量炎症细胞浸润及水肿,基底膜明显增厚,基底层平滑肌增生;A组气管基底膜及周围平滑肌少量增厚,周围未见炎症细胞浸润;C、D、E组与B组比较随着EPO浓度的升高,血管及气道周围炎症细胞逐渐减少及基底层逐渐变薄,病变程度与浓度呈负相关;F组血管及气道周围可见少量炎症细胞及略水肿,基底层略增厚。结论:促红细胞生成素(EPO)对哮喘小鼠有抗炎作用及减轻气道高反应性。
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