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目的:研究探讨人巨细胞病毒(HCMV)UL144基因在婴儿巨细胞病毒肝炎中的多态性及序列特点。 方法:入选2017年1月至2017年6月温州医科大学附属第二医院24例婴儿HCMV肝炎患者,收集患者尿液,通过离心获取尿沉渣,提取DNA;采用聚合酶链反应(PCR)扩增DNA提取物UL144基因开放读码框(ORF),并进行荧光电泳检测;扩增阳性标本进行DNA测序,并通过生物信息学工具BioEdit、MEGA5.05、GeneDoc等软件,以及Weblogo和EXPASY在线数据库进行序列特征分析。 结果: (1)临床资料:入选的24例患儿中男12例,女12例,年龄为1-4月;ALT为41-227(110.9±51.6)UI/L,AST为27-204(91.8±39.5)IU/L;所有病例HCMV-IgM均阳性,血HCMV-DNA>500拷贝/ml者仅3例,尿HCMV-DNA阳性21例,病毒载量为102-105拷贝/mL;听力损害4例,正常18例,2例未查;14例有合并症,包括脐疝、睾丸鞘膜积液、房间隔缺损、先天性巨结肠、胆汁淤积症、特发性血小板减少(ITP)。 (2)实验结果:对24例婴儿HCMV肝炎患者尿标本进行UL144全序列PCR扩增,11例阳性(其中标本IH6氨基酸编码提前终止),并对其进行基因测序;UL144基因检出率为45.8%。将Toledo株及所测得的UL144序列进行同源性比较,核苷酸同源性为56.8%-100%,氨基酸同源性为48.2%-100%;与Toledo株比较,A型和C型氨基酸序列变异性小,同源性分别为98.2%和82.9%;而B型变异性大,同源性为48.8%-49.4%。种系进化树分析显示,10例阳性标本(除外IH6)DNA序列分为3个基因型,A型(1例,10%),B型(8例,80%),C型(1例,10%),AB和AC型未测得。EXPASY数据库分析功能位点显示,除ZF-CTCHY和Prokar_Lipoprotein仅存在于UL144 B型外,其它功能位点均存在于三种基因型中;其中N-glycosylation、TNFR_NGFR_1、CRD、TNFR_C6、NCD3G呈高度保守性。 结论:婴儿巨细胞病毒肝炎HCMV UL144存在A、B、C3个基因型,其中以B型为主;A型和C型较为保守,而B型存在显著变异性;UL144基因所编码蛋白的重要功能位点具有高度保守性。