川芎嗪(Ligustrazine,Lig)是从伞形科藁本属植物川芎(ligusticum wallichii Franch)分离提纯出的生物碱单体,化学结构为四甲基吡嗪。药理研究表明川芎嗪具有改善脑缺血、扩张血管、抑制血小板聚集、抗自由基作用、防止血栓形成和保护心脏等多种作用。根据本课题组已合成的川芎嗪衍生物药理活性研究发现:2,5-二羟甲基-3,6-二甲基吡嗪(liguzinediol)通过作用于心肌细胞内的SERCA2a靶点,表现出显著的正性肌力活性,且对心律无明显影响。本文主要对liguzinediol的合成工艺及其质量标准进行研究。目的是通过合成工艺优化,降低成本,提高工业化生产的可操作性及安全性;制定质量标准,以控制原料药的质量,为工业化生产提供保障。一、liguzinediol 合成工艺以川芎嗪为原料,经过氧化、酯化、水解合成liguzinediol。liguzinediol优化后的合成工艺条件:(1)氧化反应:N,N’-二氧-2,3,5,6-四甲基吡嗪精制时,选用乙酸乙酯为重结晶溶剂,收率较高。(2)Boekelheide重排反应:改变原来的固体投料法,选用液态投料的方法,N,N’-二氧-2,3,5,6-四甲基吡嗪与乙酸酐的摩尔的比为1:7,反应温度为90 ℃,反应时间为14h;(3)水解反应:碱水解反应时间为5h。经过优化,实现了对原有工艺的改进,提高了产率,可操作性好,更适合工业化生产。产品经柱层析、重结晶提纯得到产物,纯度达99%以上。以川芎嗪计,总收率为21.4%,提高了7.6%。二、liguzinediol原料药的质量标准研究主要内容包括性状、熔点、溶解度、鉴定、有关物质和含量测定研究。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,甲醇-水溶液(20:80)为流动相,检测波长278 nm,进行有关物质和含量分析。结果表明:liguzinediol原料药的有关物质检查方法具有良好的专属性。liguzinediol原料药含量测定的方法在60 μg·ml-1～140 μg·ml-1范围内,有良好的线性关系,R= 0.9999(n=5)。该方法准确、可靠、重复性好。