团头鲂,Megalobrama amblycephala,俗称武昌鱼、鳊鱼等。团头鲂由于其独特的生长特性、优质的风味口感和高产的经济价值,团头鲂池塘养殖的集约化、规模化程度在不断扩大。近年来,由于不科学的投喂养殖技术所造成的问题日益严重。因此,本研究以团头鲂幼鱼为研究对象,首先明确包括光照、投饵率以及投喂频率在内的养殖投喂模式对团头鲂幼鱼生长性能的影响;随后,从肠道消化吸收功能、机体抗应激能力、肝脏抗氧化能力以及非特异性免疫机能和抗病力等方面系统地探究以及初步阐释光照和相应条件下的投喂策略对团头鲂幼鱼造成影响可能涉及的作用机制,本研究主要由7个部分的试验内容组成:1光照周期对团头鲂幼鱼生长、血浆激素日变化及肝脏抗氧化能力的影响为了探究光照周期与团头鲂摄食和生长之间的关系,明确光照周期是否能够影响团头鲂的生长性能,试验设置3个光照周期,分别为8L:16D、12L:12D以及16L:8D(L:Light,光照;D:Dark,黑暗)。8周的养殖试验后,每4个小时进行动态取样,24小时内共采样6次。结果发现,延长每日光照时间能够有效改善团头鲂幼鱼的生长。在本试验中,团头鲂幼鱼养殖8周后的末体长、末体重、平均增重和平均摄食量都随着每日的光照时长由8小时增加到16小时而不断增加。增加光照时长也有利于减少群体的个体差异。光照周期为12L:12D时,血浆褪黑激素在24小时内的变化规律符合余弦曲线。各组中,血浆皮质醇24小时内最低水平出现在各组设置的光照期的中间时刻,而最高水平出现在光照转化为黑暗的时刻。肝脏过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽还原酶(GPX)活性在16L:8D周期组最低,并且显著低于8L:16D组,而肝脏丙二醛(MDA)含量则呈现相反的趋势。本试验表明,设置合理的养殖光照周期能够显著提高团头鲂的生长性能,并且人工光照周期的合理使用能够用来降低群体的个体差异。此外,过度延长光照时间可能会使团头鲂产生急性应激反应,从而影响肝脏的抗氧化能力。因而,建议团头鲂幼鱼在集约化养殖条件下每天至少有12小时的光照。2光照强度对团头鲂幼鱼生长、体组成、体色及肝功能的影响对许多鱼类来说,光照是其正常生长发育必不可少的条件之一。本试验以确定团头鲂幼鱼的光照强度为试验目的,明确光照强度对团头鲂生长、体组成、体色和肝功能的影响。试验共设置5组光照强度,分别为100、200、400、800和1600 lx。养殖8周后发现,光照强度能够显著影响团头鲂的生长性能。当光照强度由100 lx增加到400 lx时,团头鲂的末重、增重、特定生长率以及采食量显著上升,当光照强度继续增加到1600 lx时,它们又显著下降。光照强度还显著影响了团头鲂鱼体的营养成分含量。随着光照强度由100 lx增加到800 lx,鱼体脂肪含量由7.2%上升到7.6%,当光照强度继续增加到1600 lx时,鱼体脂肪含量又下降到6.81%。鱼体皮肤的亮度随着光照强度的增加而不断增加。此外,肝脏天门冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)含量在400 lx光照组显著高于100和1600 lx光照组,与其他各组差异不显著。因此,在集约化养殖条件下,建议团头鲂幼鱼适宜给予400 lx左右的光照强度。3光照强度对团头鲂应激、非特异性免疫机能及抗病力的影响本试验是为了探究光照强度对团头鲂幼鱼生长、免疫机能、抗氧化力和抗病力的影响。试验共设置5组光照强度,分别为100、200、400、800和1600 lx。饲养团头鲂8周之后,向试验鱼腹腔注射一定浓度的嗜水气单孢菌,对试验鱼进行攻毒试验,并统计注射后96小时内的累计死亡率。结果发现,血浆葡萄糖和乳酸水平随着光照强度的增加而不断上升;血浆皮质醇水平在400 lx光照强度下最低。攻毒后,血浆溶菌酶(LYZ)和补体替代途径活力(ACH50)活性以及一氧化氮(NO)和球蛋白含量随着光照强度由100 lx增加到400lx而显著增加,但随着光照强度的继续增加而显著下降;肝脏丙二醛(MDA)含量与之有相反的结果,在400 lx光照强度组MDA含量最低。肝脏谷胱甘肽(GSH)酶活性在1600 lx光照强度下最低。抗氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽还原酶(GPX)活性在100-400 lx光照下差异并不显著,但是在800和1600 lx光照强度下显著上升。攻毒后,累计死亡在400 lx光照强度时最低。本试验认为,过高的光照强度(在本试验中指大于800 lx)不仅会导致团头鲂生长性能的下降,还会引起应激反应,最终影响肝脏抗氧化能力以及免疫机能的下降;过低的光照强度虽然并没有引起团头鲂的应激的反应,但影响了其肝脏抗氧化能力以及抗病力。因而,400 lx的光照强度不仅有利于团头鲂幼鱼的生长,也有利于其免疫机能的提高。4投饵率对团头鲂幼鱼生长、肠道酶活性及摄食基因相对表达量的影响本试验旨在研究不同投饵率对团头鲂幼鱼生长性能、肠道消化吸收能力和内分泌功能的影响。840尾团头鲂被随机分到24个网箱内,试验共设6个投饵率水平,分别为2、3、4、5、6和7%BW,每组有4个重复。经过八周的养殖后发现,增重率、蛋白效率比、氮保留率和能量保留率随着投饵率由2%BW增加到5%BW而显著上升,但随着投饵率继续增加到7%BW而显著下降。饵料系数随着投饵率的不断上升而不断下降。当投饵率为4%BW时,鱼体脂肪含量和能量显著高于其他各组,但投饵率并没有显著影响鱼体水分、蛋白和灰分含量。肠道脂肪酶、蛋白酶、Na+,K+-ATP、碱性磷酸酶(AKP)和肌酸激酶(CK)在投饵率为2.0-4.0%BW活性最高。此外,生长激素(GH)、类胰岛素样生长因子-I(IGF-I)、生长激素受体(GHR)以及神经肽Y(NPY)mRNA表达水平都随着投饵率由2.0%BW上升至6.0%BW而不断上升,但随着投饵率的进一步上升而下降;瘦素(LEP)以及胆囊收缩素(CCK)与之有相反的结果。以养殖8周后团头鲂的特定生长率和相应的投饵率作折线模型分析,团头鲂幼鱼阶段的每日最适投饵率为4.57%BW。5投饵率对团头鲂幼鱼非特异性免疫机能、肝脏抗氧化能力及抗低氧应激的影响第五个试验主要是为了探究不同投饵率对团头鲂抗应激能力和非特异性免疫机能的影响。试验共设置6个投饵率水平,分别为2、3、4、5、6和7%BW。在养殖试验结束之后,将团头鲂养殖于低氧条件下进行应激试验。结果表明,在低水平投喂下,团头鲂肝脏总抗氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)以及谷胱甘肤酶(GSH)活性都处在较低的水平。低水平的投喂还对团头鲂的非特异性免疫机能造成了负面影响。补体替代途径活力(ACH50)、髓过氧化物酶(MPO)以及血浆蛋白在低水平投喂下含量较低,并且低氧胁迫下的累计死亡率相对较高。过高的投饵率并没有引起团头鲂抗氧化能力和免疫功能的提高。此外,低氧胁迫应激后,团头鲂血浆葡萄糖(GLU)、皮质醇(COR)、转铁蛋白(TRF)含量以及溶菌酶(LYZ)活性显著升高,MPO、ACH50活性以及血浆球蛋白含量呈现相反的结果。投饵率以及低氧胁迫两者同时对血浆COR、GLU以及球蛋白含量造成了显著的影响。综上所述,本试验表明投饵率过低会导致团头鲂抗氧化能力、非特异性免疫应答能力以及抗低氧应激能力的下降,而过高的投饵率并没有使团头鲂更加地健康。为使团头鲂获得较好的免疫机能,建议每日最适投饵率为4-5%BW。6投喂频率对团头鲂幼鱼生长、肠道酶活性及生长轴基因相对表达水平的影响为了探究投喂频率对团头鲂幼鱼生长、肠道消化吸收酶活性以及生长轴基因相对表达水平的影响,试验选择初重为8.87±0.03 g的团头鲂幼鱼,将它们随机分为6组,每天分别投喂1、2、3、4、5和6次,试验共持续8周,每天固定投喂量为5%BW。结果发现,每天投喂3次时,团头鲂幼鱼获得最大末重(29.75±0.73 g)和增重(20.86 ±0.77 g)。当投喂频率由每日1次增加到5次时,全鱼粗脂肪含量显著上升,水分含量呈现相反的结果。肠道淀粉酶以及Na+,K+-ATP酶活性随着投喂频率由1日1次增加到3次而不断增加,但随着投喂频率的继续增加而不断下降。除此之外,在每日投喂1或2次组中,团头鲂脑部生长激素(GH)mRNA相对表达量显著低于其他各组。肝脏类胰岛素样生长因子-I(IGF-I)mRNA相对表达水平随着投喂频率由1日1次增加到3次而不断增加,但随着投喂频率的继续增加而不断下降。总之,过低或过高的投喂频率都会导致团头鲂生长的减缓、饲料利用率的下降,以及肠道酶活性和肝脏IGF-I表达量的下降。因而,建议团头鲂在幼鱼阶段的最适投喂频率为3-4次/天。7投喂频率对团头鲂应激、非特异性免疫机能及抗病力的影响本试验主要是为了探讨投喂频率对团头鲂幼鱼应激、非特异性免疫机能和抗病力的影响。试验设计6组不同投喂频率,分别为每日1、2、3、4、5和6次,饲养团头鲂8周之后,向试验鱼腹腔注射一定浓度的嗜水气单孢菌,对试验鱼进行攻毒试验,并统计注射后10日内的累计死亡率。结果发现,高频率的投喂引起了团头鲂血浆皮质醇和乳酸水平的升高。当投喂频率为3-4次/天时,团头鲂肝脏过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH)活性以及丙二醛(MDA)含量都在一个较低的水平,而谷胱甘肽还原酶(GPX)以及攻毒后血液免疫指标(包括白细胞、红细胞计数、血浆溶菌酶、补体、酸性磷酸酶和髓过氧化物酶)都在一个较高的水平。攻毒后,投喂频率为一日4次组的团头鲂的累计死亡率在各组中最低。因而我们认为,过高或过低的投喂都会造成团头鲂幼鱼的氧化应激,以至于导致免疫性能的下降以及抗病力的下降。根据本章试验结果,建议团头鲂幼鱼在集约化养殖条件下最适投喂频率为3-4次/天。