大网膜乳斑巨噬细胞表型与不同分期胃癌关系的研究

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目的:探讨大网膜乳斑巨噬细胞(M中)表型与不同分期胃癌的关系。方法:收集2011年3月至2011年12月青岛市市立医院不同分期胃癌患者大网膜乳斑标本50例(其中T1-3期30例、T4期20例)以及正常人大网膜乳斑标本10例。采用改良三步培养法及Ficoll密度梯度离心法纯化培养巨噬细胞、倒置显微镜及瑞氏染色观察细胞形态、CD68免疫荧光染色鉴定巨噬细胞、流式细胞术(FCM)检测CD68+/CD206-Mφ和CD206+M2的表达情况、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测不同时间点巨噬细胞IL-10.IL-12的分泌情况。对网膜乳斑巨噬细胞表型与胃癌病理学特征进行相关性分析。结果:免疫荧光染色大网膜乳斑CD68+巨噬细胞阳性率为69.9%。流式细胞术检测对照组、T1-3期组和T4期组大网膜乳斑CD68+/CD206-M中数量分别为(8.2959±0.0546)×105个、(7.4535±0.0546)×105个和(2.6525±0.3002)×105个,三组差异具有显著统计学意义(χ2=49.186,P<0.01);对照组及T1-3期组CD68’+/CD206-M中数量明显高于T4期组为主(F=3418.713、6305.821,P<0.01)。大网膜乳斑CD206+M2数量分别为(0.1695±0.0242)×105个、(1.0068±0.1213)×105个和(5.9144±0.2958)×105个,三组差异具有显著统计学意义(χ2=49.194,P<0.01)。T4期组CD206+M2数量明显高于对照组及T1-3期组(Z=-4.399、-5.942,P<0.01)。CD68+/CD206-M中与CD206+M2表达及胃癌T分期呈明显负相关(r=-0.586、-0.832,P<0.01),而CD206+M2的表达与胃癌T分期呈明显正相关(r=0.826,P<0.01)。ELISA检测对照组、T1-3期组大网膜乳斑巨噬细胞不同时间点IL-10的平均分泌量均低于T4期组(均P<0.05),而IL-12平均分泌量均高于T4期组(均P<0.05)。IL-12的分泌和IL-10的分泌及胃癌T分期呈明显负相关(r=-0.194、-0.476,P<0.01),而IL-10的分泌与胃癌T分期呈明显正相关(r=0.552,P<0.01)。在胃癌患者大网膜乳斑中,CD68+/CD206-Mφ、CD206’M2的表达与肿瘤是否侵犯浆膜、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05),而与肿瘤大小及分化程度无关(P>0.05)。结论:(1)影响大网膜乳斑巨噬细胞表型表达的因素包括肿瘤是否侵犯浆膜和淋巴结转移;(2)T1-3期胃癌患者,肿瘤未侵犯浆膜,大网膜乳斑M2型M中较少,仍以M1型为主,低表达膜分子CD206以及高分泌IL-12,处于免疫防御作用为主的时期;(3)T4期胃癌患者,肿瘤侵犯浆膜,大网膜乳斑M中以M2型为主,高表达膜分子CD206以及高分泌IL-10,处于促进肿瘤生长的状态。
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