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目的:淋巴结(lymph nodes, LN)作为机体的重要免疫器官,是机体抗肿瘤的主要场所,同时也是肿瘤循淋巴道转移的重要站点。癌症前哨淋巴结接收来自肿瘤组织的肿瘤细胞、肿瘤细胞碎片、及吞噬了肿瘤抗原的抗原提呈细胞(antigen presentingcells,APC)等物质,提供抗原识别和特异性免疫细胞致敏场所,并被认为具有抗肿瘤免疫作用。但目前相关研究表明,癌转移的前哨淋巴结对比未转移前哨淋巴结,其抗肿瘤免疫功能下降,进而导致肿瘤逃逸、肿瘤进展。乳腺癌是发生在乳腺组织的恶性肿瘤,淋巴道转移为其重要的转移途径,其引流区淋巴结,尤其前哨淋巴结的抗肿瘤免疫能力研究,为研究热点之一,研究结果对指导乳腺癌的治疗及预后具有重要意义。树突状细胞(dendrilic cell,DC)是人体内功能最强的APC,具有独特高效的抗原提呈、激发作用,在肿瘤细胞和T淋巴细胞的相互作用中起桥梁枢纽作用。含有较多已摄取肿瘤抗原的DC,一方面,可作为获得对肿瘤细胞具有很强杀伤作用的淋巴细胞的潜在来源;另一方面,DC又具有免疫耐受功能,可能与肿瘤转移淋巴结中肿瘤细胞免疫逃逸有关。故DC的免疫功能状态可反映淋巴结肿瘤免疫功能状态,目前针对癌症引流区淋巴结的研究表明,淋巴结内DC免疫功能强弱主要与其成熟程度及刺激T细胞能力有关。在胃癌、鼻咽癌等研究中已证实,癌转移前哨淋巴结DC成熟程度下降,抗原提呈功能下降,同时刺激T细胞分化成为细胞毒性T细胞(Cytotoxic T cell,CTL)能力下降,继而导致抗肿瘤免疫能力下降;另一方面,肿瘤组织内的DC浸润与患者预后呈正相关。本研究拟通过从临床收集乳腺癌前哨淋巴结作为研究材料,应用流式细胞技术检测乳腺癌前哨淋巴结CD83、CD86标记阳性表达率,参考取材淋巴结临床病理参数的关系,运用应用SPSS19.0统计软件包进行数据处理,结合既往研究结果,探讨乳腺癌前哨淋巴结DC功能变化所导致的免疫功能状况变化。方法:收集2013年7月至2013年12月河北医科大学第四医院乳腺中心收治的初诊Ⅰ~Ⅱ期乳腺癌且接受手术治疗患者共53名,行乳房切除+前哨淋巴结活检术22例,行乳腺癌改良根治术患者31例,所有患者均先摘取前哨淋巴结,于手术中取材前哨淋巴结1枚,沿淋巴结长径由淋巴门处正中剖开淋巴结,一半即刻置入小牛血清中培养,另一半送病理检查。术后石蜡病理证实无淋巴结转移23例(44%),有淋巴结转移30例(56%)。有前哨淋巴结转移的患者的中位年龄为51岁,无前哨淋巴结转移的患者的中位年龄为47岁。将所取淋巴结网搓法制成单细胞悬液,免疫荧光双标CD83、CD86,应用流式细胞技术分析,观察双标阳性及单标阳性在前哨淋巴结转移及无转移状态下的表达情况,后运用SPSS19.0统计软件包进行数据处理分析,继而推断乳腺癌前哨淋巴结在有转移及无转移的状态下的肿瘤免疫功能情况。结果:1CD83、CD86双阳性表达率在无转移淋巴结组为6.20±4.08%,在转移淋巴结组为1.14±0.48%,无转移组前哨淋巴结组CD83、CD86双阳性表达率明显高于转移组,两组比较有统计学意义(P=0.000)。2CD83单阳性表达率在无转移淋巴结组为15.47±15.12%,在转移淋巴结组为3.98±1.72%,无转移组前哨淋巴结组CD83阳性表达率明显高于转移组,两组比较有统计学意义(P=0.002)。3CD86单阳性表达率在无转移淋巴结中为12.35±12.14%,在转移淋巴结中为3.69±1.76%,无转移组前哨淋巴结CD86阳性表达率明显高于转移组,两组比较有统计学意义(P=0.00)。4CD83、CD86双阳性表达率在肿瘤直径≤2cm组为5.76±4.86%,肿瘤直径>2cm组为2.39±2.70%,肿瘤直径大时CD83、CD86双阳性率明显降低,两组比较有统计学意义(P=0.016)。5CD83、CD86双阳性表达率在ER(+)和/或PR(+)组为3.45±3.37%,在ER(-)PR(-)组为4.01±4.59%。ER(+)和/或PR(+)组CD83、CD86双阳性率与ER(-)PR(-)组相比无统计学意义(P=0.745)6CD83、CD86双阳性表达率在Her-2阳性组为1.62±1.46%,Her-2阴性组为4.21±4.19%,Her-2阴性组数值明显高于Her-2阳性组,两组比较有统计学意义(P=0.010)。7CD83、CD86双阳性表达率在有脉管瘤栓组为2.64±3.97%,无脉管瘤栓组为4.05±3.19%。有脉管瘤栓组CD83、CD86双阳性表达率明显低于无脉管瘤栓组,两组比较有统计学意义(P=0.000)。8本研究所有的术后石蜡病理组织分级分为Ⅱ级、Ⅲ级,CD83、CD86双阳性表达率在组织分化Ⅱ级为3.47±3.40%,在分化为Ⅲ级为3.11±3.95%,分化Ⅱ级的CD83、CD86双阳性表达率与分化Ⅲ级相比相比无统计学意义(P=0.229)。结论:1本研究表明,CD83、CD86双标阳性率在转移前哨淋巴结组明显低于无转移前哨淋巴结组。考虑在乳腺癌转移前哨淋巴结中,成熟DC数量减少,刺激T细胞活化能力降低,诱导CTL反应能力下降,存在免疫抑制。2CD83单阳性率在转移前哨淋巴结组明显低于无转移前哨淋巴结组。考虑在乳腺癌转移前哨淋巴结中,DC成熟受抑制,故成熟DC数量减少,成熟程度降低。3CD86单阳性率在转移前哨淋巴结组明显低于无转移前哨淋巴结组。考虑在乳腺癌转移前哨淋巴结中,抗原提呈过程中提供协同刺激信号能力减弱,故刺激T细胞的增殖和分化能力降低,诱导CTL反应能力下降,不能有效激活T细胞,故杀靶能力下降。4结合患者术后石蜡病理,肿瘤直径≤2cm组CD83、CD86双标阳性率明显高于直径>2cm组,说明在肿瘤直径较大时前哨淋巴结内DC成熟度越低,数量越少,刺激T细胞活化能力较弱,诱导CTL反应能力越弱,故淋巴结总体抗肿瘤免疫力收到抑制。5Her-2阴性的CD83、CD86双阳性率明显高于Her-2阳性,说明Her-2阴性前哨淋巴结内DC成熟度越高,数量越多,刺激T细胞活化能力较强,诱导CTL反应能力越强,故抗肿瘤免疫力越强,Her-2阳性前哨淋巴结内DC成熟度越低,数量越少,刺激T细胞活化能力受抑制,诱导CTL反应能力弱,故更易发生转移。6有脉管瘤栓组的CD83、CD86双阳性表达率明显低于无脉管瘤栓组,说明存在脉管瘤栓的前哨淋巴结内DC成熟度较低,数量较少,刺激T细胞活化能力较弱,诱导CTL反应能力越强,故淋巴结总体抗肿瘤免疫能力收到抑制。