背景及目的胃癌是消化系统中常见的恶性肿瘤之一,其发病率居于全球第四,是世界上第二大癌症死亡原因,具有较高的发病率和死亡率。胃癌的发病原因有很多,包括地理环境因素的影响、饮食习惯的改变、遗传基因的改变和幽门螺旋杆菌感染等。手术是其唯一根治性治疗手段,但胃癌的临床症状一般出现较晚且缺乏特异性,大多数胃癌患者就诊时已发展为晚期,失去根治性手术机会。以化疗为主的综合治疗模式是目前晚期胃癌的治疗模式,但化疗带来的严重毒副反应以及耐药基因的产生,使得患者临床获益率不高。随着分子机制的研究,靶向治疗成为目前快速发展起来的治疗模式,疗效确切且副作用小是其治疗的主要特点。目前用于胃癌的靶向治疗药物尚少,因此探究胃癌发生、发展的分子学机制,寻找抑制胃癌增殖、转移的靶点是靶向治疗的关键。TM4SF5是四跨膜蛋白超家族成员之一,由两个胞外环和一个胞内环以及N-末端和C-末端组成,含有四个跨膜结构域。TM4SF5可以与多种跨膜蛋白形成复合物,介导细胞内信号传导以调节细胞分化、增殖和迁移,如TM4SF5与整联蛋白结合介导肿瘤的发生以及细胞迁移;TM4SF5与生长因子受体结合,并增强MMP活化,促进肿瘤内新生血管的生成;TM4SF5还可通过与CD44相互作用促进循环肿瘤细胞的自我更新。TM4SF5可在食管癌中高表达,并影响预后生存;TM4SF5在肝细胞癌中介导细胞上皮-间充质转变,改变细胞骨架,使得细胞间的黏附性降低,促进细胞转移。然而,TM4SF5在胃癌组织中的表达,以及其表达程度与患者预后生存的关系尚未见报道研究。本研究应用qRT-PCR技术检测胃腺癌组织及相应癌旁组织中TM4SF5 mRNA的表达,免疫组织化学技术检测TM4SF5蛋白在胃腺癌及对应癌旁组织中的表达,旨在探究TM4SF5 mRNA以及TM4SF5蛋白在癌与癌旁组织中的表达差异,分析其表达水平与临床病理特征和患者预后生存的关系,为TM4SF5在胃癌的发生、发展、预后评估和靶向治疗等方面提供研究价值。方法1.组织标本的收集:(1)新鲜组织标本的收集:选取2015年12月01日至2016年3月31日就诊于郑州大学第一附属医院胃肠外科的46例胃腺癌患者,于手术室采集其癌与对应癌旁的新鲜组织存放于-80℃冰箱备用;(2)石蜡组织标本的收集:选取2012年1月1日至2012年12月31日就诊于郑州大学第一附属医院已行手术切除的胃腺癌患者,查阅病历,登记患者病理号,于我院病理科借出对应癌与癌旁组织的蜡块备用。2.应用定量即时聚合酶链锁反应(qRT-PCR)技术检测46例新鲜冰冻胃腺癌组织及对应癌旁组织中TM4SF5 mRNA的相对表达水平,比较其表达差异,并分析TM4SF5 mRNA在胃腺癌组织中的表达与各临床病理特征的关系。3.应用免疫组织化学方法(IHC)检测76例石蜡包埋的胃腺癌组织和对应癌旁组织中TM4SF5蛋白的表达情况,比较其表达差异,并分析TM4SF5蛋白在胃癌组织中的表达与各临床病理特征的关系。4.对76例胃腺癌患者以查阅病历或电话方式随访,记录患者胃癌生存时间和进展时间,随访截止日期至2017年9月30日。5.应用SPSS21.0软件对数据行统计学分析。结果1.qRT-PCR结果:胃腺癌组织中TM4SF5 mRNA表达高于对应癌旁组织,且差异具有统计学意义(P=0.0003),TM4SF5 mRNA的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、分期、分化程度、发生部位、是否淋巴结转移以及浸润深度均无关(P>0.05)。2.IHC结果:TM4SF5蛋白在胃腺癌组织中的表达定位于细胞膜和细胞质,且多呈现为阳性或强阳性表达,其阳性表达率为59.2%;相应癌旁组织中多表现为弱表达或阴性表达,其阳性表达率仅为13.2%,TM4SF5蛋白在癌中表达高于癌旁,且差异具有统计学意义(P=0.000)。TM4SF5蛋白表达量与淋巴结转移(P=0.008)和浸润深度(P=0.007)相关,与其他临床病理特征均无关(P>0.05)。3.对76例胃腺癌患者的预后生存分析:(1)单因素分析结果:肿瘤pTNM分期、TM4SF5蛋白表达水平均影响患者DFS、OS,TM4SF5表达越高,DFS、OS越短;(2)分层分析结果:在肿瘤同一分期层面上,TM4SF5蛋白表达高低对患者DFS无影响(P>0.05);(3)多因素分析结果:pTNM分期、TM4SF5蛋白是影响患者DFS的独立影响因素(P<0.05)。结论1)胃腺癌组织中TM4SF5 mRNA的相对表达量和蛋白质的表达水平均高于癌旁组织,提示TM4SF5可能与胃癌的发生相关。2)TM4SF5蛋白的表达水平与肿瘤的浸润深度和淋巴结转移相关,其表达水平越高,浸润程度越易深,淋巴结越易发生转移,提示TM4SF5可能促进胃癌的侵袭和转移。3)TM4SF5蛋白表达水平的高低影响患者的预后,表达量越高,患者的DFS、OS越短,TM4SF5是判断胃癌患者DFS的独立影响因素。