聚羟基脂肪酸酯(PHA)合成调控蛋白PhaR由两个不同的结构域组成:DNA结合域(DBD)和PHB颗粒结合域(GBD)。PhaR锚定在PHA颗粒结合蛋白PhaP的启动子区域,从而抑制PhaP的表达。聚羟基丁酸酯(PHB)是PHA最简单的一类,当PHB颗粒在体内积累时,PhaR与PHB颗粒结合促使PhaR从phaP启动子区域释放,进而催动phaP基因的表达。基于这个调控机制,我们开发了一种新型的细菌双杂交系统用于检测蛋白质间的相互作用,PhaR被分成两部分:DNA结合域DBD与诱饵蛋白融合,PHA颗粒结合域GBD与猎物蛋白融合,phaP被报告基因β-半乳糖苷酶基因lacZ代替。可能由于疏水性氨基酸的含量过高,GBD蛋白在体内表达后形成包涵体。所以,我们用同样与PHB颗粒有强结合能力的PhaP替代了GBD.为了研究该系统的可行性,我们选择了三组相互作用的模式蛋白bFos,bJun与bATF2。通过较高的β-半乳糖苷酶表达结果,显示bFos,bJun与bATF2之间可以两两相互作用,而且他们各自之间的相互作用均较强。相比之下,所有其他的缺少一个或多个本系统中必需元件的对照组,只检测到了很弱的β-半乳糖苷酶活性。这些结果明确地显示了该系统用于检测蛋白质之间相互作用的可行性。此外,bJun:bFos与bJun:bJun之间的相互作用要比bJun:bATF2强很多,这也通过β-半乳糖苷酶活性值的高低得到了验证,因此,该系统还可以定量检测蛋白质间相互作用的强弱。