【摘 要】
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目的(1)研究地西他滨(decitabine,DAC)联合维生素C(vitamine,VC)改善老年急性髓系白血病(acute myeloid leukemi,AML)患者疗效和生存;(2)体外研究DAC联合VC对人白血病细胞株NB4、HL60增殖的影响及可能的机制,为临床AML的治疗提供一定的理论依据。方法首先我们回顾性分析了 2010年11月~2016年04月江苏省人民医院血液科收治的≥60岁
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目的(1)研究地西他滨(decitabine,DAC)联合维生素C(vitamine,VC)改善老年急性髓系白血病(acute myeloid leukemi,AML)患者疗效和生存;(2)体外研究DAC联合VC对人白血病细胞株NB4、HL60增殖的影响及可能的机制,为临床AML的治疗提供一定的理论依据。方法首先我们回顾性分析了 2010年11月~2016年04月江苏省人民医院血液科收治的≥60岁初诊AML(M3除外)患者73例(其中34例患者接受DCAG方案治疗,39例患者接受DCAG联合VC治疗),对两组患者诱导治疗后的疗效及生存期进行比较,并观察诱导化疗后的不良反应。其次采用CCK8法检测单药DAC、单药VC及两药联合对NB4、HL60细胞增殖的影响;应用流式细胞术(FCM)检测单药DAC、单药VC及两药联合作用细胞48h后细胞凋亡比例的变化;通过实时定量PCR(qPCR)技术和Western blot印迹方法分别检测药物作用48h后TET2在mRNA和蛋白质水平的表达变化,采用ELISA法检测TET2羟化酶活性变化。结果1.DCAG组(n=34例)、DCAG联合VC组(n=39例)诱导1个疗程后CR率分别为44.1%(15例)和76.9%(30例),具有统计学差异(p=0.004);诱导2疗程后CR率分别为70.6%(24例)和84.6%(33例),无统计学差异(p=0.148);两组患者 OS 分别为 9.3m 15.3m,DCAG 联合 VC组OS明显长于DCAG组(p=0.039);2.DAC、VC单药均能抑制NB4、HL60细胞的生长增殖,且抑制作用呈剂量和时间依赖性。2.5 μmol/L DAC联合0.3 mmol/L VC组对细胞的增殖抑制作用明显强于DAC(2.5μmol/L)及VC(0.3mmol/L)单药组,提示两药联合具有一定的协同作用;3.流式检测DAC联合VC作用细胞48h后凋亡率较DAC及VC单药明显增高;4.qPCR和Western blot结果表明:VC处理细胞株48h后TET2基因表达水平不变,而DAC可使TET2基因表达水平上调;ELISA法证实VC和DAC均可引起TET2羟化酶活性增加,且两者联用具有一定的协同作用。结论:1.DAC联合VC治疗老年AML患者,可提高CR率,改善生存;2.DAC联合VC对AML细胞株NB4、HL60增殖抑制的机制可能与诱导细胞凋亡、增加TET2表达及增强TET2羟化酶活性有关。
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